细胞生物学10第十章细胞的衰老和死亡上课ppt课件精选.ppt

四、细胞凋亡的检测 1）形态学检测 2）生化特征检测 –– 主要针对核小体片段 3）流式细胞仪检测 凋亡引发包括细胞膜、细胞器和细胞核等的改变，造成荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变；以及细胞形态的改变影响了光散射特性。这些均可通过流式细胞仪检测。 普通光学显微镜 HE、甲基绿-派诺宁、Giemsa染色 荧光显微镜 吖啶橙，Heochst33258染色 电子显微镜 超薄切片 琼脂糖凝胶电泳法 原位末端标记法 ELISA法 五、细胞凋亡的生物学意义 参与和影响胚胎的发育，为机体细胞发生正常的新旧交替所必需。 清除衰老和损伤细胞，抵御外界因素的干扰，维持机体环境稳定。 对免疫系统具有重要的意义，淋巴细胞的发育分化、成熟过程中，始终伴随着细胞凋亡。 第十章 细胞的衰老与死亡 第一节 细胞衰老（cell senescence） 一、细胞衰老的概念和特点 细胞衰老： 细胞的形态结构、化学成分和生理功能逐渐衰退的现象。 大多数细胞都要经历从未分化到分化、分化到衰老、衰老到死亡的历程。 机体衰老≠细胞衰老 细胞总体的衰老反应了机体的衰老，细胞的衰老是机体衰老和老年病发病的基础。 二、 细胞的寿命与Hayflick界限 总有细胞不断地衰老与死亡，又有细胞的增殖与新生进行补充。 不同类型细胞的寿命很不一致。 细胞的寿命接近于动物的整体寿命：神经元、脂肪细胞、肌细胞等。 缓慢更新的细胞，其寿命比机体寿命短：肝细胞、胃壁细胞。 快速更新的细胞，表皮细胞、红细胞核白细胞。 细胞的寿命还受到内、外环境条件的影响 ?Hayflick界限 1961年，Hayflick 首次报道了体外培养的人成纤维细胞(human fibroblast)具有增殖分裂的极限。他利用来自胚胎和成体的成纤维细胞进行体外培养，发现胚胎的成纤维细胞分裂传代50次后开始衰退和死亡，而来自成年组织的成纤维细胞只能培养15～30代就开始死亡。 体外培养的年轻和老的人成纤维细胞的形态 物种的寿命与体外培养时细胞传代次数的关系 三、 细胞衰老的表现 1、形态改变 　1、核： 增大、染色深、核内有包含物 　2、染色质： 凝聚、固缩、碎裂、溶解 　3、质膜： 粘度增加、流动性降低 　4、细胞质： 色素积聚、空泡形成 　5、线粒体： 数目减少、体积增大 　6、高尔基体：碎裂 　7、尼氏体： 消失 　8、包含物： 糖原减少、脂肪积聚 　9、核膜： 内陷 2、分子水平的变化 　　1、DNA：从总体上DNA复制与转录在细胞衰老时均受抑制，但也有个别基因会异常激活，端粒DNA丢失，线粒体DNA特异性缺失，DNA氧化、断裂、缺失和交联，甲基化程度降低。 　　2、 RNA：mRNA和tRNA含量降低。 　　3、蛋白质：含成下降，细胞内蛋白质发生糖基化、氨甲酰化、脱氨基等修饰反应，导致蛋白质稳定性、抗原性，可消化性下降，自由基使蛋白质肽断裂，交联而变性。氨基酸由左旋变为右旋。 　　4、 酶分子：活性中心被氧化，金属离子Ca2+、Zn2+、Mg2+、Fe2+等丢失，酶分子的二级结构，溶解度，等电点发生改变，总的效应是酶失活。 　　5、脂类：不饱和脂肪酸被氧化，引起膜脂之间或与脂蛋白之间交联，膜的流动性降低。 四、细胞衰老的发生机制 （一）遗传决定学说 衰老是遗传上的一个程序化过程，其推动力和决定因素是遗传的基因组。 控制生长发育和衰老的基因都在特定时期有序地开启和关闭（衰老相关基因）。 正常儿童（左） 婴幼儿早衰症患者（右） （二）自由基学说（衰老的自由基理论） 自由基：在外层轨道上具有不成对电子的分子或原子基团。与其他物质反应时为夺取电子，引起细胞氧化性损伤。 自由基在机体代谢过程中产生（如代谢产生的活性氧基团，ROS），引发氧化性损伤，导致衰老。 污染、辐射、化学物质等可增加自由基形成。 消除自由基的物质可一定程度延缓衰老，如超氧岐化酶(SOD)、维生素E等。 （三）端粒钟学说 端粒随细胞的分裂不断缩短； 端粒长度缩短到一定阈值时，细胞进入衰老。 （四）代谢废物累积学说 细胞功能下降→代谢废物不能及时排出胞外，不能降解消化→代谢废物↑→占据的空间↑ →影响代谢废物运输→阻碍正常生理功能→衰老。 脂褐质 β淀粉样蛋白→阿尔茨海默病。 （五）基因转录或翻译差错学说 年龄增长→DNA复制效率下降，核酸、蛋白质、酶等大分子的合成差错→细胞功能降低→衰老→死亡。 （六）线粒体DNA损伤学说 （七）其他学说 抗衰老基因 SOD基因 P53基因 APOC3基因 衰老基因 MORF4基