受体植物离体培养再生系统的建立.pptVIP

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  • 2017-06-09 发布于广东
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受体植物离体培养再生系统的建立

培养所需环境条件 光照强度:一般而言,愈伤组织的形成并不需要光照;           培养前期1000-4000lx,后期10000 lx。 光照时数:不同培养的组织其光照时间不同,如烟草愈伤                  组织采用1000 lx 16小时/日培养; 而花椰菜组织培养则以4000 lx 9小时/日光照为宜 光质:一般采用日光灯作为光源。组织培养中关键的器 官形成作用,是种光形态发生现象,是受光敏色素 控制的。 温度:一般习惯将培养物置于恒温下,通常应用的温度为 25OC 左右。 光 受体系统建立时,需要对相关的抗生素种类及其浓度进行试验筛选(抗生素敏感性试验) 抑制农杆菌生长的抗生素种类和浓度的筛选要考虑植物种类和农杆菌株系两个方面 对植物细胞无毒,不显著抑制植物细胞生长 浓度以能够抑制农杆菌生长而不妨碍植物生长的浓度为宜 用于转化子筛选的抗生素浓度的确定 二、抗生素敏感性 抗生素敏感性测定 设计出愈伤组织诱导或分化再生培养基,高压灭菌后加入不同种类、不同浓度梯度的无菌抗生素;再将未经转化的受体材料至于选择培

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