2017-2018年高中生物 第一单元 生物技术与生物工程 第二章 细胞工程 第1节 动物细胞培养学案 中图版选修3.docVIP

第二章　细胞工程 第一节　动物细胞培养 1．简述动物细胞培养的基本条件和过程。(重点) 2．说明细胞株与细胞系的特点和区别。(难点) 3．简述动物细胞培养的意义。 动 物 细 胞 培 养 的 概 念 与 基 本 条 件 1．动物细胞培养的概念 细胞培养是细胞工程中最基础的技术，它是把机体的某一组织或器官取出，分散为单个细胞，使其在人工培养条件下继续生存、生长甚至增殖的过程。 2．细胞培养的基本条件 (1)严格的无毒无菌条件 离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力。 (2)基本营养物质和生长因子 (3)适宜的温度和酸碱度 (4)气体环境 探讨：动物细胞培养时采取哪些措施得到无菌、无毒的环境？ 提示：(1)对培养液、所有的培养用具进行无菌处理。 (2)在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。 (3)定期更换培养液，以清除代谢产物，防止对细胞自身造成伤害。 探讨：动物细胞进行培养时为什么通常添加动物血清？ 提示：血清中由于含有许多未知成分，会对细胞的生长和增殖有促进作用。 一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件：(1)无菌、无毒的环境；(2)营养，如需要糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分；(3)适宜的温度和pH；(4)适宜的气体环境。 1．下列关于动物细胞培养液的叙述，不正确的是(　　) A．为了防止培养过程中出现细菌污染，可以在培养液中添加抗生素 B．细胞培养液中必须有糖、氨基酸等化合物以及动物血清等天然成分 C．空气中再混入5%的CO2主要作用是维持培养液的pH D．培养液应该定期更换防止代谢产物积累对细胞自身造成危害 【解析】　动物细胞培养液通常需要加入动物血清、血浆，有时也采用无血清培养。 【答案】　B 2．体外培养小鼠肝脏细胞，对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个培养新鲜小鼠的肝脏的装置示意图。请回答下列问题。 (1)操作前，要将小鼠肝脏切成小薄片，并且用________酶处理，获得单个细胞，有利于肝脏细胞_______________________________________________ ________________________。 (2)图中的培养液相当于小鼠体内肝脏细胞直接生活的________，其理化性质主要包括____________________等三个方面。 (3)气室中充入5%CO2和95%O2，其中O2的作用是 ______________________________________________________________， 其反应式为：__________________________________________________。 (4)在培养过程中要在无菌无毒的环境中进行，通常还选择合适的菌种，在培养液中添加一定量的抗生素，目的是_________________________________。 此外还要定期更换培养液，以便清除________________________________， 防止对肝细胞造成伤害。 (5)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。 材料用具：肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)，有机物X溶液等。实验过程： ①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。 ②利用甲、乙、丙、丁4组按上图所示装置。按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。 甲 乙 丙 丁 步骤一：加入肝脏培养液 √ √ √ √ 步骤二：加入有机物X溶液 √ √ 步骤三：放置肝脏小块 √ 上表中还需进行的操作是_________________________________________， 作为对照组。 ③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4等份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。 ④一段时间后取培养到________期的淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察________________，并对比分析。若_______________________________ _______________________________________________________________， 则说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用。 【解析】　(1)将肝脏组织分解成单个细胞用胰蛋白酶处理，有利于肝脏细胞充分接触营养液，吸收氧气和营养物质、排出CO2和代谢废物。 (2)培养液是细胞生活的直接环境，相当于内环境，内环境的理化性质包括