孟加拉红培养基.docVIP

　　编号：021010 　　中文名称： 孟加拉红培养基(虎红琼脂) 　　英文名称：Rose Bengal Agar 　　用 途： 　　供霉菌和酵母的计数、分离和培养用(GB/T4789.15-2010和化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。 　　原 理： 蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长;孟加拉红作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。　　配方(每升)： 　　蛋白胨5g 　　葡萄糖10g 　　磷酸二氢钾1g 　　硫酸镁 0.5g 　　琼脂15g 　　孟加拉红 0.03g 　　氯霉素0.1g 　　最终pH 7.2±0.2 　　使用方法(计数用法)： 　　1、 称取本品31.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min。 　　2、 无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌水的玻璃三角瓶中，振摇30min，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。 　　3、 根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。 　　4、 将凉至45℃左右的培养基注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于25—28℃培养箱中培养。 　　5、 3d后开始观察结果，共培养观察5d。 　　6、 计算方法：通常选择菌落数在10—150之间的平皿进行计数(如食品卫生国家标准)，也有选用5—50个之间的平皿进行计数(化妆品卫生规范)，同稀释度的2个平皿菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克(或每mL)检样中所含霉菌和酵母菌数。 　　质量控制： 　　本品倾注平皿后呈玫瑰红色，下列菌株接种后20—25℃培养72h生长情况如下表。 　菌 名　　　　菌 号　　　　生长状况　　　　　菌落特征 黑曲霉　　　ATCC16404 　　　良好　　　　菌丝白色孢子黑色，底部玫瑰红色 白色念珠菌　　ATCC10231　　　 良好　　　　　　菌落表面呈奶油色 大肠埃希氏菌　ATCC25922　　　被抑制　　　　　　　　—— 　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。 　　规 格：250g