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大肠杆菌高效感受态细胞的制备及快捷转化体系的建立
北方园艺2010( 14) : 127~ 130 # #
杨 坤, 巩振 辉, 李 大伟
( , 712100)
: 比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率, 并优化了质粒DNA 转化
感受态细胞体系结果表明: 高效法制备的感受态细胞转化效率极显著高于普通法制备感受态
细胞的转化效率,其效率提高了966. 1%, 而高效法感受态细胞转化效率与商品化的感受态细胞
转化效率差异不显著- 80e 超低温长期保存时,相比较于15% 甘油,以7% DMSO 为冻存保护
7
剂保存的感受态细胞其转化效率达到1. 1@ 10 , 较 15% 甘油冻存保护剂保存的转化效率提高了
7
69%温浴5 min, 冰浴10 min 时,其转化效率最高, 达到4. 95@ 10 应用高效法制备的感受态
细胞转化不同大小质粒的效率极显著高于普通大肠杆菌感受态细胞, 其转化效率较普通大肠杆
菌感受态细胞的提高了550%, 而转化时间缩短至普通大肠杆菌感受态细胞的12. 5%, 仅为15
min
: ;; DNA;
: Q 943. 2 :A : 1001- 0009(2010) 14- 0127- 04
:杨坤( 1984-) , 男, 陕西咸阳人,在读硕士, 现主要从
, DNA
事蔬菜育种及生物技术研究工作
2 :
: 巩 辉( 1957-) , 男, 陕西礼泉人, 博士, 教授, 博士生导
师, 现主要从事蔬菜种质资源与生物技术研究工作 DNA ,
[ 1]
: 国家自然科学基金资助项目 ;
/ 131150科技创新工程重大科技专项资助项目( 2008ZDKG-03) ;教 ,
育部高校博士点基金资助项目(200807120007) ,
:2010- 04- 15
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