02-1体积排阻色谱与光散射技术SEC-MALS2014.pptxVIP

;主要内容;多角度光散射法：两种测定模式;SEC = Size Exclusion Chromatography（体积排阻色谱） Size Exclusion Chromatography (SEC) ：基于高分子分子尺寸大小不同而分离的色谱法。（分子尺寸大小：hydrodynamic volume.） MALS = Multi-Angle Light Scattering（多角度光散射） SEC-MALS: 多角度光散射与体积排阻法联用技术;体积排阻色谱;传统SEC 假设弊端;高分子表征的需要;典型光散射与色谱联用配置;对于水相体系，建议使用0.1 μm 对流动相过滤；而对于有机相体系，建议使用0.2 μm 对流动相过滤； 使用在线脱气装置（In-line degasser）； 添加在线过滤器（ In-line membrane filter ）： 水相体系：PEEK 材质在线过滤器；有机相体系：不锈钢材质在线过滤器； 逐步增加或降低流速，切不可大幅度调整流速； ;摩尔质量 - 定义;范例: 2 个分子 (“1-mer” 和 “9-mer”) 相对分子质量分别是1和9ass;LS;均方根半径 （旋转半径）;模板参数创建（Template Generation ）: 归一化系数（Normalization coefficients）激光光电二极管检测能力差异修正 延迟体积（Alignment ）：检测器间管路体积。 宽峰校正（Band broadening）：样品稀释效应修正。 仪器系统有效性确认（System Validation）;建立仪器参数: “第一针” -- BSA;数据分析- Baselines;数据分析 – Peaks;使用各向同性的高分子对（不包含90度角）不同角度光电二极管相对于90度进行归一化。 修正光电二极管灵敏度及几何形状差异。 归一化要求: 各向同性散射体 必须用流动相配制。 同一检测池中使用。 ;光散射信号叠加图（ Overlay plots ）;修正LS与浓度型检测器之间管路体积 。 ;为什么使用单分散性样品修正?;Alignment Band Broadening 修正 ;检测器间的宽峰效应：Band Broadening;检测器间的宽峰效应：Band Broadening;参数;Zimm Plot ：在单机试验中，进样系列浓度不能太低。 Debye Plot ：在联机模式下，仅需要1个浓度（低浓度）。 两者拟合数据的数学公式：Zimm Formalism: 其它拟合公式: Debye, Berry, Random Coil ; Zimm 公式的 Debye Plot ;Zimm 公式;数据分析- Distribution Plots;数据分析- EASI Table;EASI Graph：摩尔质量分布曲线;均方根半径分布曲线;摩尔质量与均方分半径分布???累计摩尔质量与均方根半径;摩尔质量与均方分半径分布：微分摩尔质量与均方根半径;BSA ：累积与微分摩尔质量分布曲线;判断多分散性样品 对于rms radius 10 nm样品* ，Mw 和 rms radius 同时可以测定； * 而半径 10 nm时，Mw 与特性粘度或QELS 数据可以揭示分子构象信息。;构象图了解高分子支化信息;单机模式 vs. 联机模式 SEC-MALS ：Mn，Mw，Mz，PD，分子构象 SEC-MALS 试验: 散射光强度，浓度， dn/dc (Debye plot, A2) 建立 SEC-MALS 系统参数: normalization，alignment/band broadening 摩尔质量与均方半径分布曲线：Easi Graphs 构象图：log Rg vs. log Mw;附 录;Zimm Formalism;Berry Formalism;Debye Formalism;Random Coil Formalism