脂联素对皖南花猪下丘脑生殖内分泌的影响.pdfVIP

摘 要 皖南花猪是安徽省黄山市的地方优良猪种之一，具有繁殖率高、产仔多、肉质好 等优良特性。脂联素是主要由脂肪组织细胞分泌的一种生物活性物质，与动物的生殖 性能有着十分密切的关系。本试验通过测定分析皖南花猪血清中脂联素（Adiponectin, Adp GnRH GnIH Adiponectinreceptor, ）， 和 含量；下丘脑组织中脂联素、脂联素受体 （ AdpR）、GnRH和GnIH基因表达量的发育性变化规律及相关性，进而探讨Adp与皖南 花猪生殖作用的联系。通过重组脂联素（recombinantadiponectin,rAdp）对小鼠下丘 GnRH GnIH GnRH GnIH Adp 脑 细胞和 细胞的 和 基因表达的影响，探索 对下丘脑生殖激 素合成的影响。 1 体内试验：脂联素与GnRH和GnIH在皖南花猪下丘脑组织中的发育 性变化及其相关性研究 随机选取0d、30d、45d、90d、180d的皖南花猪各 10头 （公、母各5头）进行 ELISA Adp GnRH GnIH FQ-PCR 试验。 法测定血清中 、 和 激素的水平；用 法检测下 丘脑组织中Adp、AdpR1、AdpR2、GnRH和GnIHmRNA 的表达。结果显示： （1）皖南花猪血清脂联素与GnRH和GnIH水平均有极显著的发育性变化，在 30d GnRH GnIH 时脂联素极显著低于其他日龄，而 和 显著或极显著高于其他日龄 （P0.05或P0.01）。 （2）皖南花猪下丘脑组织脂联素mRNA表达量很低，AdpR1、AdpR2mRNA在 P0.05 AdpR1mRNA 不同发育阶段的表达量相对稳定 （ ）， 表达量在各个日龄均显著 高于AdpR2 （P0.05）。皖南花猪下丘脑组织GnRH、GnIHmRNA发育性变化总体 呈下降趋势，GnRH、GnIHmRNA在下丘脑中的发育性变化总体呈下降趋势，GnRH GnIHmRNA 45d 90d GnRHmRNA 和 表达量分别在 和 最低。刚出生的母猪下丘脑 表达量显著高于其他日龄（P0.05）。 （3）性别间比较发现，公猪AdpR1mRNA在0d，AdpR2 和GnRHmRNA在30 d显著高于母猪（P0.05）。 （4）相关性分析结果：皖南花猪下丘脑组织中AdpR1 与GnRH表达量显著负相 关 （P0.05）；血清中Adp与GnRH水平显著负相关 （P0.05），母猪Adp与GnRH P0.05 GnRH GnIH 显著负相关（ ）。 与 含量在公、母猪和总体上均极显著正相关 （P0.01）。 以上结果提示：在皖南花猪发育过程中脂联素可能通过内分泌并由AdpR1介导 从而抑制GnRH 的分泌，而这种抑制主要表现在母猪中。 I 2 体外试验：脂联素对小鼠下丘脑细胞生殖激素基因表达的影响 选取怀孕 18d 的小鼠在无菌条件下取胎鼠下丘脑组织分离培养下丘脑细胞。培养 5d后用重组脂联素处理，试验设置4h和24h两个时间点，每个时间点设置2µg/ml 和 10µg/ml FQ-PCR AdpR1 AdpR2 GnRH GnIH 两个浓度。 方法检测下丘脑细胞中