三华李SRAP反应体系的建立与优化.pdfVIP

浙江农业学报Ac把A咖cuft¨me夙咖o，铲瑚厶，2013，25(5)：1002-1006http：／／www．zjnyxb．cn 谢志亮，刘成明，吴振旺，等．三华李sRAP反应体系的建立与优化[J]．浙江农业学报，2013，25(5)：1002．1006． 三华李SRAP反应体系的建立与优化 谢志亮1。2，刘成明2，吴振旺1，马均2，彭 兵2，方少秋2，何业华2，+ (1温州科技职业学院／温州市农业科学研究院，浙江温州325006；2华南农业大学园艺学院，广东广州510640) 摘要：以三华李品系中的白脆鸡麻李1为供试材料，利用分步优化法对影响SRAP—PCR反应的5个因子进 15 行优化，确立了三华李的sRAP．PcR反应体系：模板DNAng，M矛+浓度3．oH-mo卜L_。，引物浓度o．25¨皿01． 0．3 L-。，dNTPs u，10×Bu虢r mmo卜L～，砌DNA聚合酶1．0 2．5山，反应总体积为25灿，其余部分用 ddH，0补充。利用优化的体系对18份李属种质资源进行扩增，经6％聚丙烯酰胺凝胶检测显示：条带清晰可 靠、多态性好，可用于三华李的分子标记研究。 关键词：三华李；sRAP反应体系；优化 中图分类号：S662．3 文献标志码：A of for Constmctionand SRAPreaction SaIlhua op6mization system pl哪 xIE Ye_hua2+ Jun2，PENG shao-qiu2，HE zhi．1ian91’-，LIucheng．min孑，wuzhen—wan91，MA Bin92，FANG (1耽，配幻“％co￡幻眦fc02fegeQ厂S啦肥死如加fogy，耽磁buAc础，砂矿A础比umZSc如M郡，耽胁ou325DD6， 吼i舳；2coffe酽。厂舶n如u如Ⅲ，soumC矗讹Ag疵H此Hmf‰妇倦酊，‰呼胁u5，嘶们，吼讹) of cultivarBaicui 1 selectedf而mSanhua to thef如torsSRAP· Abstract：Theplum Jimali plum，w硒usedoptimize that for ina PCRreac— PCR resultsindicatedthe SRAP-PCR Sanhua stepbystep．The optimal system plum 25斗L tionconsistedof15 DNA u ng template，3．ommo卜L叫M∥+，o．25斗mo卜L～primer，o．3mmo卜L叫dN仲，1．o 10×Bufferand ofthis reaction in ac— 7幻DNApolymerase，2．5斗L ddH20．Applicationoptimum systemeighteen that cessionsof clear isdemonstrated plumby6％