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2 蛋白质化学 Prion在病理组织中的纤维状聚合体 O2 transport 组织 肺或鳃 静脉 动脉 脱氧血红蛋白 氧合血红蛋白 肌红蛋白 血红蛋白和肌红蛋白的氧合曲线 静脉血 动脉血 血红蛋白 肌红蛋白 氧分压 氧饱和度 别构效应(allosteric effect)：又称变构效应，是指寡聚蛋白与配基结合，改变蛋白质构象，导致蛋白质生物活性改变的现象。 一个亚基与氧结合后，引起该亚基构象改变 进而引起另三个亚基的构象改变 整个分子构象改变 与氧的结合能力增加 血红蛋白的别构效应（协同作用） 齐变模式（concerted model）：由于一个底物或别构调节剂的结合，蛋白质的构象在T（对底物亲和性低的构象）和R（对底物亲和性高的构象）之间变换。这一模式提出所有蛋白质的亚基都具有相同的构象，或是T构象，或是R构象。序变模式（sequential model）：一个配体的结合会诱导它结合的亚基的三级结构的变化，并使相邻亚基的构象发生很大的变化。按照序变模式，只有一个亚基对配体具有高的亲和力。 紧张状态 松弛状态 一、一级结构与功能的关系 二、空间结构与功能的关系 1、一级结构的种属差异与分子进化 2、一级结构的变异与分子病 1、核糖核酸酶 2、肌红蛋白和血红蛋白的结构与功能 3、疯牛病 蛋白质构象疾病：若蛋白质的折叠发生错误，尽管其一级结构不变，但蛋白质的构象发生改变，仍可影响其功能，严重时可导致疾病发生。 生物体内的每一个基因均受到来自生物演化的选择压，其结果是每个蛋白质均有其独特（和唯一的）的立体的结构和生化生理功能。 蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。 这类疾病包括：人纹状体脊髓变性病、老年痴呆症、亨停顿舞蹈病、疯牛病等。 43%α-helix 30%α-helix 43%β-sheet 一条肽链对应一个特定的空间结构。 这条法则的破坏是灾难性的。导致疯牛病的prion就是一个例子。 疯牛病中的蛋白质构象改变 疯牛病是由朊病毒蛋白(prion protein, PrP)结构改变引起的一组人和动物神经退行性病变。 正常的PrP富含α-螺旋，称为PrPc。 PrPc在某种蛋白的作用下可转变成全为β-折叠的PrPsc，从而致病。 PrPc α-螺旋 PrPsc β-折叠 正常 疯牛病 2.1 氨基酸 2.2 肽 2.3 蛋白质的分子结构 2.4 蛋白质结构与功能的关系 2.5 蛋白质的重要性质 2.6 蛋白质的分类 2.5 蛋白质的重要性质 两性解离及等电点 胶体性质 沉淀反应 变性与复性 紫外吸收与呈色反应 一、蛋白质的两性解离及等电点 当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点(isoelectric point, pI) 。 在不含任何盐的纯水中进行等电点测定，此时测得的等电点称为蛋白质的等离子点。 pH=pI 净电荷=0 pHpI 净电荷为负 Pr COOH NH3+ + H+ + OH- + H+ + OH- Pr COO- NH2 Pr COO- NH3+ pHpI 净电荷为正 不处于等电状态的蛋白质分子，由于带有电荷，可采用电泳技术进行分离。 电泳：在外电场的作用下，带电颗粒向着与其电性相反的电极移动。 蛋白质在等电点时，没有相同电荷间的相互排斥，最不稳定，溶解度最小，极易形成沉淀析出；粘度、渗透压、膨胀性和导电能力均为最小。 二、蛋白质的胶体性质 分散系统 真溶液　分散相质点＜１ｎｍ 悬浊液：分散相质点＞１００ｎｍ 胶体溶液　１ｎｍ＜分散相质点＜１００ｎｍ 　　从蛋白质相对分子量的测定和形状的观测知道，蛋白质的分子大小范围属于胶体质点的范围，是一种亲水胶体。 蛋白质分子在水溶液中的存在状态 （1）两性电解质，由于静电力的作用，分子间相互排斥，形成稳定的分散系。 （2）蛋白质周围形成水化膜，保护了蛋白质粒子，避免了相互碰撞。 三、蛋白质的沉淀反应 + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 水化膜 + + + + + + + + 带正电荷的蛋白质 － － － － － － － － 带负电荷的蛋白质 不稳定的蛋白质颗粒 酸 碱 酸 碱 酸 碱 脱水作用 脱水作用 脱水作用 溶液中蛋白质的聚沉 沉淀方法类别: 1、高浓度中性盐(ｐ31) 2、有机溶剂 3、重金属盐 4、生物碱试剂 盐析法:在蛋白质溶液