真核表达与原核表达的德国小蠊变应原Blag2蛋白结构的光讲述.PDFVIP

第 2 6 卷 , 第5 期 　 　　　　　　　　　　　光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol 26 ,No5 ,pp 879883 2 0 0 6 年 5 月 　　　　　　　　　　　 　Sp ect ro scop y and Sp ect ral Analy si s May , 2006 　 真核表达与原核表达的德国小蠊变应原 Bla g 2 蛋白结构的光谱学研究 1 1 2 1 刘志刚 , 朱健琦 , 黄海珍 , 徐 　宏 1. 深圳大学生命科学学院 , 广东 深圳 　5 18060 　　　　　　　　　　　　　　　　 2 . 中国科学院长春应用化学研究所电分析化学国家重点实验室 , 吉林 长春 　130022 摘 　要 　在基因工程技术中 , 采用原核表达系统获得的重组蛋白是以包涵体的形式存在 , 在细胞内聚集成 无生物活性的不溶性颗粒 , 而采用真核表达系统收获的蛋白已经是经过正确的体内折叠的活性蛋白。文章 分别用真核与原核表达系统表达重组变应原 , 通过对不同来源 目的蛋白的荧光光谱和 CD 谱的比较和分析 , 对真核系统与原核系统表达出的Bla g 2 蛋白的高级构象进行研究 , 阐明了Bla g 2 在溶液中的二级结构 , 并 推断出其三级结构组成类型 。 主题词 　德国小蠊 ; 变应原 ; Bla g 2 ; 真核表达 ; 原核表达 ; 荧光光谱 ; CD 谱 中图分类号 : O6573 　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : (2006) 白构象和 良好生物活性的蛋白质 。尽管经过这些过程 , 有时 引　言 所获得的目的蛋白质仍难恢复其天然构象[2 ] 。而真核载体具 有转录后加工功能、翻译后加工功能及跨膜运输机制 , 因 ( ) ( ) 　　变态反应性 过敏性 疾病被世界卫生组织 W HO 认 此 , 利用真核系统所收获的蛋白已是经过体内折叠 , 并分泌 为是当前世界性的重大卫生学问题 。变应原是指能诱发 Ig E 到胞外的可溶活性蛋白。 类抗体产生并导致变态反应的抗原 , 又称为过敏原 , 包括粉 ( ) 蛋白质的结构是功能的基础 , 同一个外源基因 Bla g 2 尘 、昆虫类 、动物皮毛 、植物及植物花粉 、食物等 。德国小蠊 采用不同的表达系统所得到的目的蛋 白的一级结构是相同 变应原 Bla g 2 蛋白是一种天冬氨酸酶 , 它是引起致敏性疾 的 , 而高级构象上的差异导致了生物学活性的显著差异 。目 病如过敏性哮喘、过敏性鼻炎 、过敏性皮炎及过敏性结膜炎 前 , 国外对 Bla g 2 的结构进行了深入的研究 , Arruda 等纯 的主要致敏变应原之一 。 化了天然的Bla g 2 蛋白, 并得到其 cDN A 序列[3 ] , 其后 , 许 随着基因工程的发展 , 目前已经可以得到包括 Bla g