HPLC法测定跳骨胶囊中士的宁的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定跳骨胶囊中士的宁的含量论文 姚家元 孟祥军 吕 洁 邹春阳 王凤秋 【摘要】 目的：测定跳骨胶囊中士的宁的含量。方法：采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱：Diamonsil C18（250×4.6mm，5μm）；流动相：0.03mol/L；甲酸溶液（用三乙胺调节PH至3.0±0.1）-乙腈（78︰22）；流速：1.0ml/min；检测波长：254nm。结果：士的宁在196.8～426.4ng范围内，浓度与峰面积线性关系良好（r=0.9984）。平均回收率为99.70%，RSD为2.2%（n=9），方法的精密度、稳定性及重现性良好。结论：本试验所建立的定量分析方法简便、快速准确，可作为跳骨胶囊的质控标准。 【关键词】 跳骨胶囊 士的宁 高效液相色谱法（HPLC） 【Abasract】 Objective: To determination the content of Strychnine in Tiaogu Capsules by HPLC. Methods：HPLC onsil C18（250×4.6mm，5μm）column ol/Lformic acid（triethylamineo adjust pH 3.0±0.1）-acetonitrile（78∶22） as a mobile phase,.freell/min and detection . Results: The method had good linear realationship ethod is suitable for the formulate of the quality standard ethod is simpie、fast and accurate. It can be used for quality control of Tiaogu Capsules. 【Key onsil C18柱（250×4.6mm，5μm），流速：1ml/min。甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。士的宁（供含量测定用，110705-200306），中国药品生物制品检定所。跳骨胶囊样品由山东绿因制药有限公司提供，批 2 方法与结果 2.1 色谱条件与流动相 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；用0.03mol/L甲酸溶液（用三乙胺调节PH至3.0±1.0）-乙腈（78︰22）为流动相：检测波长为254nm；流速1.0 ml/min.理论板数按士的宁峰计算应不低于4000。 2.2 检测波长的确定 取士的宁对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，摇匀，照紫外分光光度法（中国药典2005年版一部附录V A），在190～400nm处扫描，溶液在254nm波长处有最大吸收，初步确定检测波长为254nm。 2.3 士的宁含量测定线性关系试验 照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录Ⅵ B）试验。取士的宁对照品0.0164g，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取6、8、10、11、13ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密量取20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，结果见表6。以峰面积（Y）对进样量（X，μg）进行线性回归，回归方程为Y=0.7092X－0.914，相关系数r=0.9984。结果见表1。表1 士的宁线性关系试验结果结果表明，士的宁进样量在196.8～426.4ng范围内，峰面积与士的宁进样量线性关系良好。 2.4 溶液稳定性试验 照系统适用性试验项下制备供试品溶液，每隔2小时进样测定一次，共测定8小时，计算含量，结果见表2。表2 溶液稳定性试验结果结果表明，供试品溶液在8小时内基本稳定。 2.5 精密度试验 2.5.1 重复性试验 精密量取系统适用性试验项下供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，连续测定6次，结果见表3。表3 重复性试验结果结果表明，本法精密度良好。 2.5.2 重现性试验 照系统适用性试验项下的制备方法，分别制备6份供试品溶液，分别精密量取20μl，连续测定6次，计算含量，结果见表4。表4 重现性试验结果结果表明，本法重现性良好。 2.6 回收率试验 取士的宁对照品0.0158g，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，从中精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 取装量差异项下的内容物适量，研细，取约1.2g，精密称定，加浓氨试液1ml与氯仿20ml混合的溶液，加热回流1小时，放冷，抽滤，用20ml氯仿分3次洗涤滤渣及滤器，合并滤液与洗液，置分液漏斗中，用硫酸溶液（3-100）提取5次，每次15ml，合并硫酸液，加浓氨液调节PH值至9～10