HPLCELSD法测定β内酰胺类抗生素注射剂中精氨酸的含量论文.docVIP

　　HPLCELSD法测定β内酰胺类抗生素注射剂中精氨酸的含量论文 【摘要】 目的 建立高效液相色谱蒸发光散射检测法(HPLCELSD)分析β内酰胺类抗生素注射用制剂中精氨酸的含量。 方法 采用Agilent Zorbax SBC18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱，流动相为0.1%三氟乙酸溶液∶乙腈(80∶20)，流速为0.8ml/min，漂移管温度为45℃，雾化气体压力为3.5bar。结果 供试品中精氨酸与抗生素主药及相关杂质分离良好，在10.27～314μg/ml的范围内呈较好的线性关系(r=0.99986)，在盐酸头孢吡肟中的平均回收率为101.5%.freell。结论 本法专属、快捷，结果准确，重现性好，可以作为部分β内酰胺类抗生素注射用制剂中添加的活性物质精氨酸的含量测定方法。 【关键词】 β内酰胺类抗生素； 精氨酸； 含量测定； 高效液相色谱法； 蒸发光散射检测器 ABSTRACT Objective To develop an HPLCELSD method for determination of arginine in βlactam antibilotic injection. Methods The column: Agilent Zorbax SBC18 (4.6mm×250mm，5μm); the mobile phase∶0.1mol/L trifluoroacetic acidmethanol (80∶20); the drift tube temperature: 45℃; the pressure of nebulizing gas: 3.5bar. Results Good separation of arginine and main related substances could be achieved. The standard curve l (r=0.99986). The average recovery in cefepime hydrochloride it of detection and quantification l and 10μg/ml respectively. Conclusion The method is simple and rapid,.freelethod could be used for analysis of arginine in βlactam antibilotic injection. KEY antibilotic; Arginine; Determination; HPLC; ELSD 目前已上市或申请上市的部分β内酰胺类抗生素注射用制剂中常添加有碱性助溶剂(主要是碳酸钠或碳酸氢钠和精氨酸两大类)，以便临床应用中配制注射液时能够提高药物分子结构中酸性基团的解离程度，增强药物的水溶性。针对目前中国药典对含助溶剂的β内酰胺类抗生素注射用制剂的质控现状及国外药典对同类抗生素注射用制剂的质控发展趋势，认为应建立对所含助溶剂含量进行准确测定的方法，以考察所含助溶剂对制剂中主药质量(比旋度、纯度和有关物质)和稳定性的影响。为进一步提高我国药典对该类抗生素制剂质量标准控制水平提供科学、全面的评价依据，本文选择以精氨酸为检测对象进行研究。 由于精氨酸在紫外区缺乏特征性吸收，故部分含精氨酸的药物制剂其现行国家标准一般采用柱前衍生化法、或用强极性的二醇基柱(也有部分标准采用十八烷基硅烷键合硅胶柱加离子对试剂)以紫外末端吸收波长(通常为200～206nm)进行检测的HPLC法对其含量进行测定［1～9］。柱前衍生化HPLC法操作过程烦琐、影响因素较多，测定误差较大；另外二醇基柱为非常规色谱柱，实验室不够普及，限制了方法的实用价值；若采用极限末端吸收波长(210nm以下)为检测手段，易放大溶剂和共存物质的干扰性响应，引起意外的检测偏差。本文参考有关文献［10～13］，采用质量型蒸发光散射检测技术(ELSD)，建立准确、快速测定β内酰胺类抗生素注射用制剂中精氨酸含量的HPLCELSD方法。 1 仪器与试药 Agilent1100组合式全自动高效液相色谱仪，Dikma SEDEX 75型ELSD检测器。 水为重蒸水；三氟乙酸、乙腈均为色谱纯。精氨酸对照品2批(6379903，872200203)均由中国药品生物制品检定所提供。精氨酸工作对照品(S0501，99.5%)、盐酸头孢吡肟原料药1批(061101)及注射用盐酸头孢吡肟样品3批(070201、070202、070203)，注射用头孢拉定样品3批(060301、060302、060303)，氨曲南原料药1批(030501)及注射用氨曲南样