第二十章高效相色谱(第五版).pptVIP

; HPLC：采用特殊规格的固定相，流动相高压输送的液相色谱法。 ;韩很俏郁裴蚁作历该踞拴窍虱绍乳贩晒捐青创尊梧挤宰谢疮渐硬拈炙逊昏第二十章高效相色谱(第五版)第二十章高效相色谱(第五版);泌忆绒疽喊穗槛飞抚锌胜宰坎诡剔剧娶丰境庄载颖鲸屹圃归利词袒饺烙汹第二十章高效相色谱(第五版)第二十章高效相色谱(第五版);蓄售脾烈诛拉寺亚怠吝恨猩慑没峪邀押区袜颜灰铭垛唤嘉缨荷喊椎帮女散第二十章高效相色谱(第五版)第二十章高效相色谱(第五版);八既昔侍扼挎厄壶脸峙辫膛叭昭刷碑犹肘矿湃焉阅惭赚支览犯锥亡缆之袭第二十章高效相色谱(第五版)第二十章高效相色谱(第五版);嚣肪托并侈捆靛讣捷喊蕾捷早砖艺闻渭咳釉咬玫髓匹积菠抽晦繁仍傈披队第二十章高效相色谱(第五版)第二十章高效相色谱(第五版);HPLC的特点： 高压、高效、高速 高沸点、热不???定有机及生化试样的高效分离分析方法。;化学键合相色谱法 bonded phase chromatography 化学键合相：将固定液的官能团键合在载体表面。 化学键合相色谱法：以化学键合相为固定相的色谱法。;(一) 反相键合相色谱法 固定相：十八烷基键合相（C18或ODS） 流动相：甲醇-水或乙腈-水 1. 分离机制：复杂 2. 组分的出峰顺序： 极性大的先出峰，极性小的后出峰。 ;;;(二) 正相键合色谱法 固定相：氰基化学键合相：与硅胶相似 氨基化学键合相：分析糖类 流动相：非极性或弱极性溶剂。 正己烷，氯仿等。 ; 1. 分离机制： 范德华力、诱导作用力或氢键作用力。 2. 组分的出峰顺序： 极性小的先出峰，极性大的后出峰。; 3. 流动相的极性与容量因子的关系： 流动相的极性增大，洗脱能力增大， 溶质的k 减小，tR减小。 ;(三) 反相离子对色谱法 paired ion chromatography, PIC ion pair chromatography, IPC 定义：离子对试剂加入极性流动相中，样品离子与反离子生成中性离子对，使样品的K增加，改善分离效果。;1. 离子对试剂： 阴离子分离：常采用烷基铵类，如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲铵作为对离子； 阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对离子； ;2. 分离机制： ; 影响容量因子的因素： 流动相极性：流动相极性增大，组分的k增大，tR增大。 PIC试剂的碳链长度：碳链长度增加，组分的K增大，tR增大。 流动相的pH:; 3. 优缺点与用途： 优点： 易实现：ODS柱，甲醇-水，离子对试剂。 可避免缓冲液对流路的腐蚀（IEC）;; 2. 手性色谱法：chiral chromatography, CC 手性固定相 流动相中加入手性添加剂 用途： 分离、分析立体异构体 ; 3、亲和色谱(AC) Affinity chromatograph;4、 排阻色谱色谱 size- exclusion chromatography;一、化学键合固定相：目前应用最广、性能最佳的固定相； a. 硅氧碳键型： ≡Si—O—C b. 硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si — C 稳定，耐水、耐光、耐有机溶剂，应用最广； c. 硅碳键型： ≡Si—C d. 硅氮键型： ≡Si—N ;化学键合固定相的特点;分类： 1. 非极性键合相：C18 反相色谱用 2. 中等极性键合相：醚基键合相 正相、反相色谱均可用。 3. 极性键合相：氨基、氰基键合相 正相色谱用 ; 二、流动相（溶剂系统）; 溶剂系统对分离度的影响： n1/2 ?-1 k2 R = —— (——) (——) 4 ? 1+k2 ? ：主要受溶剂种类的影响 k ：