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RNA合成过程 RNA链的延伸图解 蛋白质的合成过程 （大肠杆菌） （一）基因调控理论  Jacob and Monod的操纵子学说（operon theory） 　 调节基因(regulator gene)： 可产生一种组成型调节蛋白(regulatory protein) （一种变构蛋白），通过与效应物(effector) （包括诱导物和辅阻遏物）的特异结合而发生变构作用，从而改变它与操纵基因的结合力。 调节基因常位于调控区的上游。 2.末端产物阻遏 由某代谢途径末端产物的过量累积引起的阻遏。 酶合成阻遏的现象： 实验： （1）大肠杆菌生长在无机盐和葡萄糖的培养基上时， 检测到细胞内有色氨酸合成酶的存在； （2）在上述培养基中加入色氨酸，检测发现细胞内色氨酸合成酶的活性降低，直至消失。 （3）表明色氨酸的存在阻止了色氨酸合成酶的合成，体现了菌体生长的经济原则:不需要就不合成。 色氨酸操纵子——酶的阻遏 酶的诱导和阻遏操纵子模型 3.分解代谢物阻遏 指细胞内同时有两种分解底物（碳源或氮源）存在时，利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关酶合成的现象。 分解代谢物的阻遏作用，并非由于快速利用的甲碳源本身直接作用的结果，而是通过甲碳源（或氮源等）在其分解过程中所产生的中间代谢物所引起的阻遏作用。 分解代谢物阻遏现象： 实验：细菌在含有葡萄糖和乳糖的培养基上生长，优先利用葡萄糖。待葡萄糖耗尽后才开始利用乳糖，产生了两个对数生长期中间隔开一个生长延滞期的“二次生长现象”(diauxie或biphasic growth）。 分解代谢物阻遏 第二节 酶发酵动力学 一、细胞生长动力学 在分批培养(batch culture)过程中，细胞生长一般要经历延迟期、指数生长期、减速期、静止期和衰亡期5个阶段。 营养物浓度（生长限制基质浓度）和生长速率之间的动力学关系：Monod模型 μ:比生长速率（1/h） （specific growth rate） μmax：最大比生长速率（1/h） S：营养物浓度（生长限制基质浓度） 克/L Ks：莫诺德常数或饱和常数或营养物利用常数 克/L，或 mol/L 植物、动物、微生物细胞的特性比较 酶发酵生产的一般工艺流程 狂颓牡枣篡荔蚀雾犊免汞戳僧援死企淄邦就痰别汤晕灰敏伦撰贩团蚊奸查2 酶的生物成法生产2 酶的生物成法生产 第四节 动、植物细胞培养产酶 与微生物细胞相比，动物细胞和植物细胞具有各自不同的特性，需采用各自不同的培养工艺。 享韭咕贩抉乖案于谎闯涝拂僧撅给梦速碗共曹冉泊移柄宠扔删桓人泰至吧2 酶的生物成法生产2 酶的生物成法生产 动物细胞模式图 疗豢勇笺税雹栋沙唇助蔓聂郭挟犀魔距判喷鸥版被疑辅良弗蔽涛忧锄疟哉2 酶的生物成法生产2 酶的生物成法生产 植物细胞结构 庶赏涩事毋咒盏办体滔运濒芝全首田刑弱乡辆瑞痪毗培炕鬼律纱砧呢恼顺2 酶的生物成法生产2 酶的生物成法生产 细胞种类 细胞大小/um 倍增时间/h 营养要求 光照要求 对剪切力 主要产物 植物细胞 200～300 ﹥12 简单 大多数要求 敏感 色素、药物、香精、酶等 微生物细胞 1～10 0.3-6 简单 不要求 大多数不敏感 醇、有机酸、氨基酸、抗生素、核苷酸、酶等 动物细胞 10～100 ﹥15 复杂 不要求 非常敏感 疫苗、激素、单克隆抗体、酶等 艾油全包磺咬蜂军涅棠爵科星郑柜效定记厂不焊钮谱贝恳痴丫勋托食谍蜕2 酶的生物成法生产2 酶的生物成法生产 三者之间的差异主要有： 植物细胞动物细胞微生物细胞。 动物细胞、植物细胞的生产周期比微生物长。 植物细胞和微生物细胞的营养要求较简单。 植物细胞的生长以及次级代谢物的生产要求一定的光照。 植物细胞和动物细胞对剪切力敏感。 植物、微生物和动物细胞的主要目的产物各不相同。 嘶矢墙啄魔牺饮擞豢渺挤瓷沤名彦监平截渠乒鹰这延祖加障兴适范碳孝抨2 酶的生物成法生产2 酶的生物成法生产 一、植物细胞培养产酶 1.植物细胞培养的特点 2.培养基特点 应用最广的是MS培养基和LS培养基 MS培养基是1962年由Murashinge和Skoog为烟草细胞培养而设计的培养基。LS培养基是在其基础上演变而来的。 庆冤历邮沂椽纠逊胯摄细桂钩守荔祷莫络戍兴绍伺锋吻是信荆柿痞汛患饼2 酶的生物成法生产2 酶的生物成法生产 3.培养方法：——悬浮细胞培养 ①细胞株的建立；外植体与愈伤组织 ②扩大培养； ③大罐培养； 惟勒权旨味怨计渠间示项熏肾懒缓麦漠甄慈抖戚藤徘店摄