神经生长因子对豚鼠形觉剥夺性近视凋亡作用的探讨.pdfVIP

2007届颂}二研究生论文 神经生长堋子对形觉剥夺性近视豚鼠视网膜细胞凋产作用的探讨 割DNA，使参与DNA损伤修复过程的聚ADP核糖聚合酶，以及DNA依赖的蛋白激 酶等失活，促使染色质浓缩和核酸酶激活，导致细胞凋亡。 神经生长因子是一种蛋白质，广泛存在于动物体内，不仅能够维持感觉神经 元存活和神经纤维生长，还有在个体发育期间增加分枝及保护分化后神经元的特 殊功能，能够增加感觉神经肽基因的表达，鉴于此，我们设计了利用形觉剥夺性 近视动物模型，运用玻璃体腔注射神经生长因子的方法干预近视形成过程，从而 了解神经生长因子对形觉剥夺性近视的作用，为近视的防治提供新的思路。 目的 通过运用半透明眼罩遮盖豚鼠眼睛以形成形觉剥夺性近视，并在形觉剥夺性 近视形成过程中形觉剥夺眼玻璃体内注射神经生长因子进行干预，观察其对形觉 剥夺性近视的影响，从而探讨神经生长因子对形觉剥夺性近视的影响，为近视的 防治提供新的实验依据。 方法 50只l周龄健康三色豚鼠随机分为三组，第1组10只，第2组和第3组各 20只，每只豚鼠均用半透明眼罩遮盖右眼，各组豚鼠室内分笼饲养，自由饮食， 室内日光灯照明，每日照明与黑暗时间均为12小时，第一组实验动物不进行其 它干预，右眼遮盖第12周麻醉下微量进样器分别向第2和第3组遮盖眼玻璃体 内注射神经生长因子5pg(illg／p1)和生理盐水5ul，隔日1次，共3次，每 组豚鼠在形觉剥夺12周后由同一验光经验丰富的验光师在暗室内带状检影验 光，散光按等效球镜计算，验光前一小时用复方托品咔胺点眼散瞳4次。氯胺酮 麻醉后做A型超声测量眼球前后径(自角膜顶点到玻璃体与视网膜交界处后极点 距离，每眼测量5次，取平均值)，水合氯醛过量麻醉致死后立即取出眼球，除 去筋膜，固定，包埋，切片后运用SP免疫组化检测视网膜中Caspase-3的表达， 运用TUNEL技术检测视网膜凋亡细胞，操作步骤均严格按说明书进行。 结果 1．三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比视网膜内核层与外核层细胞 减少，细胞排列稀疏，由于视网膜神经节细胞单层排列，并且稀疏，所以在光镜 下观察差异不明显。第3组实验动物遮盖眼视网膜与第2组比较显示内核层与外 Ⅱ 21107届顾lj研究生论文 神经生长因子对形觉剥夺牲近税职鼠视州膜细胞嗣r=作用的探讨 核层细胞减少，细胞排列稀疏。 2．三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比均形成相对性近视；形觉剥夺 觉剥夺眼眼轴最短，为9．84±1．17ram，第3组形觉剥夺眼眼轴长度为9．86± 1．1lmm。 3．三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比眼轴长度差异均有统计学意 义；第2组试验动物的形觉剥夺眼眼轴长度为9．84±1．17rma，与1、3两组形觉 剥夺眼眼轴长度相比差异没有统计学意义；1、3两组形觉剥夺眼眼轴长度相比 差异没有统计学意义； 4．三组实验动物形觉剥夺眼与自身对照眼相比屈光度差异有统计学意义； 第2组试验动物的形觉剥夺眼屈光度为-9．25+1．80D，与1、3两组形觉剥夺眼 屈光度相比差异没有统计学意义l而1、3两组形觉剥夺眼屈光度相比差异没有 统计学意义； 5．第2组实验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞凋亡率为1．41±0．42(单位％)， 第3组试验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞凋亡率为2．03+_0．73(单位％)，第l 组试验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞凋亡率为2．14±0．58(单位％)，1、3组 与第2组相比差异均有统计学意义； 6．另外，我们发现利用吸光光度值测定法反映Caspase．3表达情况显示，第 2组试验动物的形觉剥夺眼视网膜细胞中Caspase．3表达最少，与第3组试验动 物的形觉剥夺眼视网膜细胞中Caspase-3表达相比差异有统计学意义。视网膜细 胞中Caspase-3表达与视网膜细胞凋亡率具有相关性。 结论 神经生长因子能够抑制豚鼠形觉剥夺性近视视网膜细胞凋亡的发生。 半透明眼罩遮盖法建立豚鼠近视动物模型是成功的。 关键词：神经生长因子豚鼠形觉剥夺近视 Ⅲ 2007届硕十研究生论文 神经生长凶于对形觉剥夺性近视豚鼠视网膜细胞凋亡作用的探讨 To actionofNGFtoretinal