磷酸寡糖的设备及分离研究.pdfVIP

中文摘要 磷酸寡糖（Phosphorylated oligosaccharides,Pos ）是指麦芽低聚糖中的葡萄糖残基 通过共价键与磷酸酯键（C-O-P ）相连接的一种新型功能性低聚糖，主要组成成分是 聚合度在 3~6 之间的麦芽寡糖。上世纪九十年代日本学者 Kamasaka, H 在对马铃薯淀 粉进行水解研究时发现了磷酸寡糖这一新型的具有特殊功效的低聚糖，并对其进行了 进一步研究。磷酸寡糖除了具备一般寡糖的功能特性外，还具有抑制体内不溶性钙盐 的形成，从而促进钙质的吸收和溶解，还可强化牙齿釉质再矿化，达到防止龋齿的目 的。同时具有抗淀粉老化，无不良风味及口感，在食品、医药、保健及饲料添加剂等 行业可以广泛应用。 本实验研究了磷酸寡糖前体—低 DE 值的麦芽低聚糖的制备方法，以马铃薯淀粉 为原料，采用全酶法对其进行液化、糖化处理。综合考虑了对制备工艺有主要影响的 因素 pH 、酶用量、糖化时间和糖化温度，通过单因素实验分别考虑对 DE 值的影响 程度，再设计正交试验优选出低 DE 值麦芽低聚糖的最佳制备条件为：20% 的淀粉浆， pH6.1 ，耐高温α-淀粉酶 10μl，真菌酶用量 1.0μl，普鲁兰酶用量 1.0μl，糖化温度 60℃， 糖化时间 120min。优选出的制备工艺将DE 值控制在 30%～40% 内，麦芽低聚糖的得 率较高，为后期磷酸寡糖的制备和提取奠定了很好的基础。 本实验采用阴离子交换树脂对磷酸寡糖进行分离纯化，考察了 5 种阴离子交换树 脂 D201 ，7170，D315 ，AB-8 ，201 ×4 对磷酸寡糖的洗脱收率，通过静态吸附试验 综合考虑吸附率和解析率最终选择 7170 强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂为分离制备 磷酸寡糖的树脂填料，同时对洗脱浓度及洗脱速度的优化确定了 7170 分离磷酸寡糖 的工艺条件：去离子水洗脱中性糖后，以含有 0.1mol/LNaCl 的乙酸—乙酸钠缓冲液 洗脱磷酸寡糖，洗脱速度为 1.5mL/min。 采用薄层色谱法和HPAEC-PAD法对磷酸寡糖进行组分分析，同时结合红外光谱 - 1 溴化钾压片法进一步对其进行组分和结构分析，结果表明磷酸寡糖在 1080cm 处有 P-O-C基团的伸缩振动吸收峰，928cm-1 处有五价磷的P-O伸展振动。进一步确定了磷 酸寡糖是分子中结合有磷酸根的聚合度在 2~7 之间的麦芽低聚糖的混合物。 本实验进行了磷酸寡糖中试制备的工艺设计，主要工艺包括喷射液化工序、糖化 工序、离子交换分离工序和浓缩工序，设计了主要的工艺流程图。同时，进行了中试 设配配置以及产业化的前期研究，使磷酸寡糖制备具有经济可行性，为其产业化生产 铺垫直接基础。 关键词：磷酸寡糖，全酶法，分离纯化，定性分析 I Abstracts Phosphorylated oligosaccharides (Pos) is a kind of new functional oligosaccharide, which refers to the malto oligosaccharide within covalently-bound phosphate groups (C -o-galloylhyperin P) linked to the glucose residues, and the degree of polymerization is between 3 ~ 6. As a new oligosaccharides of special functions ,Pos was found in a hydrolysis research of potato starch by a Japanese scholars Kamasaka,