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磁性微粒分离纯化糖蛋白方法的建立及应用论文
西北大学硕士论文
mm。摸索WGA与环氧磁粒偶联条件,确定其在pH4条件下偶联效率可达850,
初步研究得到偶联时间以1h为最佳。利用固定化的WGA分离纯化健康人血清
中唾液酸化糖蛋白,SDS电泳显示WGA磁粒可在高丰度蛋白质干扰的情
况下实现对低丰度蛋白质较好的分离效果。
结论:以环氧基修饰的磁性微粒为固定化载体可实现多种凝集素的固定化修饰。
在不同的条件下可实现不同凝集素的高效偶联。利用环氧磁粒固定化凝集素分离
纯化复杂样品中的糖蛋白,可应用于蛋白质组学研究。结合双向电泳技术首次建
Liver和肝癌细胞SMMS.7721LCA结合糖蛋白的差
立了健康人肝脏细胞Chang
异表达谱。
关键字磁性微粒小扁豆凝集素麦胚凝集素糖蛋白质组学双向电泳肝癌
荧光染色差异表达谱
西北大学硕士论文
Purification
Magnetic
GlycoproteinUsing
Particle—-Lectin
Conjugates
Abstract
establishanewlectinimmobilizationmethod
Purpose:To supportedby
andsialicacid
magnetic bondingglycosylatedproteins
epoxy-coatedparticles.LCA
werefractionedand thismethodfromvarious
biological
protein purifiedby samples,
andwere 2D
analyzedby technologypreliminarily.
Method:Weusedanewlectin method functionalized
affinity supportedby
enrichthe methodof
magnetic tofractionateand glycosylatedproteins.This
particles
with Culinaris
usingepoxy-coatedmagneticparticlescoupledLCA(LensAgglutinin)
or Germ the fromtotal
WGA(WheatAgglutinin)toseparategIycosylationprotein
wasestablished also theeffectof
protein and叩timized.Westudy
metalon to
andbivalenceion LCA epoxy-coated
Ct··methyl··D··mannoside
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