microRNA的实时定量茎环RT-PCR技术.docVIP

microRNA的实时定量茎环RT-PCR技术 摘要： 已开发一种新型的microRNA（miRNA）的方法利用茎环Taqman PCR分析。茎环RT引物在RT 和特异性方面比传统的更好。TaqMan miRNA的检测成熟miRNAmiRNAs。此外，他们不会受到基因组DNA污染。精确量化低至25皮克的总RNA大多数miRNA。事实上，这种方法灵敏度高，特异性和精密允许无核酸纯化，直接分析单细胞。如标准TaqMan基因表达分析TaqMan miRNA的检测显示出了7个数量级的动态范围。七个小鼠组织miRNA定量显示10到超过30000个。这种方法可以快速，准确，灵敏miRNA表达谱，并能识别和监控特定组织或疾病的潜在生物标志物。茎环RT-PCR可用于其他小RNA分子，如短干扰RNA（siRNAs）的量化。此外，为更好的特异性和效率茎环RT引物设计的概念可以应用在小分子RNA克隆和多重检测miRNA是自然发生的，高度保守家庭，。miRNA在动物和植物的基因组发现。到为止，有1000个独特的，在桑格中心miRNA的注册表中包括326人类miRNA。 miRNA是通过催化mRNA的分裂或抑制调节基因表达。他们被认为细胞发育，分化和。具体职责包括调节细胞增殖和，发育时间，细胞死亡，造血，神经发育，人类肿瘤与DNA甲基化和染色质修饰。 虽然miRNA的相对丰富，其表达水平物种之间相差