1.1 DNA重组技术的基本工具.ppt

【例2】 下列关于DNA连接酶的作用，叙述正确的是(　　) A．能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，也能将双链DNA分子的黏性末端之间的氢键进行连接 B．将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键 C．连接两条DNA链上碱基之间的氢键 D．将断开的两个DNA片段的骨架连接起来,重新形成磷酸二酯键 D 变式训练 据下图所示,有关酶功能的叙述错误的是(　　) A．限制性核酸内切酶可以切断a处 B．DNA聚合酶可以连接a处 C．解旋酶可以使b处解开 D．DNA连接酶可以连接c处 D 解析：选D。限制性核酸内切酶切割DNA分子时破坏的是DNA链中的磷酸二酯键，如题图a处。DNA聚合酶是将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键，因此DNA聚合酶可以连接a处。解旋酶能解开碱基对之间的氢键，即使b处解开，DNA连接酶连接的是两个相邻的脱氧核苷酸的磷酸和脱氧核糖,形成磷酸二酯键,如a处。而图示的c处连接的是同一个脱氧核苷酸的磷酸和脱氧核糖。 要点三　常用的载体——质粒 1.来源：质粒主要存在于细菌、酵母菌等生物中。 2.结构：是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并且具有自我复制能力的双链环状DNA分子，如下图所示： 3.标记基因：质粒上有一些特殊的基因，如抗四环素基因、抗氨苄青霉素基因，用于对重组DNA进行鉴定和选择。 4.载体的作用 (1)用它作为运载工具，将目的基因送入受体 细胞中去。 (2)利用它在受体细胞内对目的基因进行大量 复制。 特别提醒 　(1)主动运输中载体的化学本质是蛋白质，其作用是运输离子、氨基酸、核苷酸等物质进出细胞。 (2)基因工程中的载体的化学本质是DNA，其作用是携带目的基因进入受体细胞。 限制性核 酸内切酶 原核 双链DNA分子中特定的核苷 酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 DNA连接酶 磷酸二酯键 课堂小结 载体 质粒 动植物病毒 能在受体细胞中复制并稳定保存 具有一至多个限制酶切割位点， 供外源DNA片段插入 具有标记基因，供重组DNA 的鉴定和选择 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 1.了解限制酶及DNA连接酶的来源。 2.掌握限制酶及DNA连接酶的作用。[难点] 3.理解载体需具备的条件。[重点] 学习目标 自学指导 怎样才能顺利达到上述目标？要靠大家紧张有效的自学。请同学们认真阅读教材P4-7，思考下列问题，10分钟后进行检测。比一比，看谁知识掌握得最牢固. 1、什么是基因工程？其原理和优点各 是什么？ 2、基因工程中三种基本工具的作用分 别是什么？ 3、工具酶的作用部位分别在哪儿？ 4、具备什么条件才能充当“分子运输 车”？ 思考题 基因工程的别名 __________________ 操作环境 生物体外 操作对象 _________ 操作水平 _________________ 结果 _______________________ DNA重组技术 基因 DNA分子水平 新的生物类型和生物产品 知识点一 基因工程概念的理解 【教材梳理】 想一想 1．从结构上分析，为什么不同生物的DNA能 够重组？ 【提示】　(1)基本单位相同。 (2)空间结构相同。 知识点二 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1.来源：主要来自于___________。 2.特点 (1)识别双链DNA分子的某种___________序 列; (2)使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_____________断开。 原核生物 特定核苷酸 磷酸二酯键 3.作用结果 (1)黏性末端：在所识别序列的_____________将DNA的两条链分别切开时形成的末端。 (2)平末端：在所识别序列的_________处切开时形成的末端。 中心轴线两侧 中心轴线 想一想 2．限制性核酸内切酶的作用特点体现了酶的哪种特性？ 【提示】　限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列，并且只能在特定部位切割，这说明了酶具有专一性。 知识点三 DNA连接酶——“分子缝合针” 1..种类 大肠杆菌 黏性 T4噬菌体 平 2.作用：将切下的DNA片段“缝合”，恢复被限制酶切开的___________，拼接成新的DNA分子。 知识点四 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 1..种类：质粒、__________的衍生物、动植物病毒等。 磷酸二酯键 λ噬菌体 2.适合作为载体的特点 (1)有一个至多个_________切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中。 (2)进入受体细胞后，能够停留在细胞中___________，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA同步复制。 (3)有特殊