microRNA31转基因小鼠与昆明小鼠脊髓损伤模型胃肠动力变化的研究-培训课件.pptVIP

microRNA-31转基因小鼠与昆明小鼠脊髓损伤模型胃肠动力变化的研究 导 师：闫 军 研 究 生：王德君 专 业：普通外科 目录 一、研究背景 二、研究内容及其意义 三、研究方案 四、实验特色与创新 五、研究基础与条件 六、预期研究成果 七、研究计划 八、经费预算 九、参考文献 研究背景 近年来，随着交通和建筑业的迅速发展，脊柱骨折合并脊髓损伤（Spinal cord injury,SCI）已成为骨科领域中常见的疾患。据统计发达国家的SCI发病率为28.3-45人/百万人/年，我国发病率虽较低，约6.7人/百万年/年，但每年也有1万余人遭此损伤，且以中青年胸腰段损伤最多。脊髓损伤治疗困难，终身残疾率较高，给社会和家庭带来沉重的负担。SCI后患者将要面对五项主要的问题：行走能力、大便控制、小便控制、性功能、疼痛，如何处理好这些问题仍是难题。近年来，国内外对SCI后疼痛、行走能力的处理、尿动力等多方面的研究较多，并取得一定的进展。与之相比，SCI后胃肠功能紊乱和排便功能障碍并没有得到足够的重视，而该问题会对患者的日常生活能力和回归社会产生终身影响，给患者的生活、家庭及社会 研究背景 造成巨大的负担。多项研究表明，在SCI稳定以后，胃肠道功能紊乱可导致患者一系列的问题：独立排便障碍、便秘、腹胀大便失禁、排便耗时明显延长、饮食受限、户外活动受限、精神压力乃至影响寿命等。研究表明：胃肠运动是在中枢神经系统、植物神经系统及内源性肠神经系统的参与下进行的。其运动主要有中枢神经系统来完成，植物神经系统及内源性肠神经系统起调整作用。这三部分任何一部分的异常都将导致疾病的产生。有“肠脑”之称的中枢神经系统是胃肠调节机制中的决定性环节。肠神经系统是由胃肠道、胆道及胰腺中所含的神经节及其间的神经纤维组成，控制着胃肠道的运动、分泌、血流及物质转运功能，并把胃肠与中枢神经系统及植物神经系统联系起来。肠道内神经末梢释放的化学物质较为复杂，与运动有关的神经递质主要有血管 研究背景 活性肠肽、一氧化氮、乙酰胆碱、P物质等。而胃动素受体、生长抑素受体在肠神经系统都有分布，提示胃动素和生长抑素的作用是通过神经系统通路和对平滑肌的直接作用共同来完成的。研究表明，miR-31在维持神经干细胞增殖中起着比较重要的作用。从而我们可以利用microRNA-31对脊髓损伤有修复作用来研究SCI后microRNA-31转基因小鼠胃肠动力变化与昆明小鼠胃肠动力变化的差异。研究SCI后的胃肠功能障碍对提高患者生活质量、重返社会、延长寿命具有重要意义。 研究目的：利用microRNA对脊髓损伤有修复作用来研究SCI后microRNA转基因小鼠胃肠动力变化与昆明小鼠胃肠动力变化的差异。 研究内容及其意义 本研究的主要内容是： 1、脊髓损伤后胃肠动力的改变； 2、影响胃肠动力的两大主要激素：胃动素和生长抑素 3、胃窦MTL-R1A mRNA和结肠SSTR2 mRNA的表达 研究SCI后的胃肠功能障碍对提高患者生活质量、重返社会、延长寿命具有重要意义。 研究方案 实验思考 技术路线图 实验方法 拟解决的关键技术问题 实验思考 临床——基础研究——临床 microRNA-31 胃动素 脊髓损伤 和生长抑素 转基因小鼠 的变化 随机分组 技术路线图 microRNA-31转基因小鼠 脊髓损伤 对照组 于第3d、7d、14d 分别处死2只 胃排空和小肠推进率 脊髓组织病理观察、 胃窦MTL-R1A 和 结肠SSTR2 的mRNA的表达 同前 同前 昆明小鼠 脊髓损伤 对照组 于第3d、7d、14d 分别处死2只 同前 胃排空和小肠推进率 胃窦MTL-R1A 和 结肠SSTR2 的mRNA的表达 同前 造模 实验方法 1 脊髓损伤模型的建立： 用脊髓打击器建立脊髓损伤模型，采用BBB 评 分法，选择BBB评分0分的小鼠为造模成功 2 小鼠的运动能力评定： 采用改良后CBS法进行动物运动行为评分，观察 指标包括开放空间运动能力、脚趾伸展、触地 反射、回缩反射、翻正反射、斜板试验。并且 对小鼠双后肢的运动功能观察，采用BBB评分 3 分组： 取microRNA-31转基因小鼠和昆明小鼠各20雌雄不拘，将microRNA-31转基因小鼠随机分为两组，其中对照组10只，脊髓损伤组10只，将昆明小鼠随机分为两组，其中对照组10只，脊髓