1.2《基因工程的基本操作程序》ppt.pptVIP

基因表达载体的构建需要考虑的因素 基因的特点 选择强启动子或组织特异性启动子 选择标记基因 2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法、感受态细胞法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 （2）基因枪法 （3）花粉管通道法 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 受精卵 新性状动物 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法：感受态细胞法 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 四、目的基因的检测与鉴定 ——检查是否成功 （一）、检测 1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因 (关键步骤) ①首先取出转基因生物的基因组DNA ②用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针 ③使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明染色体已插入染色体DNA中 （1