AZF基因缺失与男性精子缺陷的相关性论文.docVIP

　　AZF基因缺失与男性精子缺陷的相关性论文 【摘要】 目的 了解AZF基因与男性精子缺陷发生的关系。方法 采用多重聚合酶链反应-琼脂糖电泳检测技术，利用挑选的AZFa、AZFb、AZFc共3个区域的6个序列标签位点(STS)，对80例精子正常男性、142例特发性无精子症和113例重度少精子症病人进行AZF微缺失分析。结果 正常男性组未检出AZF基因缺失；特发性无精子症组检出AZF缺失21例(14.79%)，其中AZFa缺失1例，AZFb缺失3例，AZFc缺失14例，AZFb+AZFc缺失3例；重度少精子症组检出AZF缺失14例(12.39%)，其中AZFc缺失12例.freelily and spermatogenic impairment. MethodsMultiplex PCR and agarose gel electrophoresis tests icrodeletion in 80 normal men, 142 ia and 113 ia icrodeletions al men; in azoospermia group, 21(14.79%) cases icrodeletions ia group, 14(12.39%) microdeletions ia and oligozoospermia groups al subjects, the difference ia and oligozoospermia groups. ConclusionMicrodeletion of AZF gene is one of the causes leading to azoospermia and severe oligozoospermia, ent of sperm defect. ［KEY gCl2，50 mmol/L KCl，200 μmol/L dNTP,.freelin；94 ℃ 30 s，58 ℃ 45 s，72 ℃45 s，共35个循环；72 ℃延伸3 min，最后置于4 ℃保温。表1 PCR扩增所用的引物序列 1.2.4 PCR产物检测 PCR 产物分析用15 g/L琼脂糖电泳，100 bp的DNA分子标记，电压90 V，电泳2 h。 1.2.5 检测结果确认 在正常男性所有位点均有扩增条带、正常女性无扩增条带的基础上,待检标本部分位点在多重PCR与单独扩增中均无产物出现为有缺失，待检标本所有位点均有扩增为无缺失。 1.3 统计学处理 采用SPSS 11.0统计软件进行数据处理，数据间比较用χ2检验。 2 结 果 本文正常男性组在AZFa、AZFb、AZFc区均未发现AZF基因缺失。特发性无精子症组发现并证实AZFa区缺失1例，AZFb区缺失3例，AZFc区缺失14例，AZFb+AZFc区复合缺失3例，其总缺失率为14.79％。重度少精子症组AZFc区缺失12例，AZFb+AZFc区复合缺失2例，其总缺失率为12.39%（图1）。特发性无精子症组、重度少精子症组AZF基因缺失率与正常男性组比较，差异均有显著性(χ2=11.39、8.92，P 0.01)；特发性无精子症组与重度少精子症组AZF缺失比较，差异无显著性(χ2=0.31,P 0.05)。 3 讨 论 近年来，男性不育的发病率日趋增高，遗传因素是男性不育的主要病因之一。细胞遗传学研究表 图1 PCR扩增产物电泳图 Mark:DL2000；①空白对照； ②女性样本（阴性对照）；③正常生育男性（阳性对照）；④无精子症病人AZFa片段中的SY84缺失样本；⑤无精子病人AZFb片段中的SY127缺失样本；⑥重度少精子症病人AZFc片段中的SY255缺失样本；⑦无精子症病人AZFb片段中的SY127和AZFc片段中的SY255缺失的样本 明，性染色体异常是原发性无精子症发生的根本原因之一［2］。1976年，TIEPLOLO等［3］提出Y染色体长臂存在控制精子发生的AZF，其缺失可导致无精子症或严重的少精子症。现已明确至少有3个与精子发生直接相关的基因片段——AZFa、AZFb、AZFc，分别位于Yq11.23的近、中、远端。 本研究对80例精子正常男性、142例特发性无精子症与113例重度少精症病人进行AZF微缺失检测分析，结果显示，正常男性未检出AZF微缺失，特发性无精子症病人中共检出AZF微缺失21例（14.79%）, 重度少精症病人中检出AZF微缺失14例（12.39%）。特发性无精子症组、重度少精子症组AZF缺失率与正常男性组比较，差异有显著性，说明AZF基因缺失与男性精子发生缺陷有密切的关系。有研究显示，正常男性具有AZFc区gr/gr及DAZ基因拷贝缺失［4］。AZF基因中的微缺失部