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ClC3 在人肺癌中的表达及分布论文.doc
ClC3 在人肺癌中的表达及分布论文
王丙清,宋立强,吴昌归
【Abstract】 AIM: To investigate the expression and biological significance of CIC3 in pulmonary carcinoma. METHODS: The expression of CIC3 in pulmonary carcinoma samples from 76 patients munohistochemistry. RESULTS: There ples (90.8%) ples. No sample al control group(n=10). CIC3 ainly located in the membrance and plasma of oncocytes and capillary endothelial cells. The expression of CIC3 rose as TNM stage of cancer stepped up. CONCLUSION: CIC3 expresses monly in pulmonary carcinoma and its metastasis, ay be related to TNM staging.
【Keyonary carcinoma;CIC3 protein; immunohistochemistry; chloride channel
【摘要】 目的: 探讨ClC3 在人肺癌组织中的表达及其生物学意义. 方法: 应用免疫组织化学染色技术检测76 例人肺癌标本中ClC3 蛋白的表达. 结果: 76 例人肺癌标本中阳性表达69例(90.8%),对照组10 例正常肺组织ClC3 蛋白的表达为阴性;而蛋白表达阳性的69例肺癌中,ClC3 主要位于瘤细胞和微血管内皮细胞的胞浆内或细胞膜上. 随着TNM分期升级,ClC3 蛋白表达也呈逐渐上调趋势(P 0.01). 结论: ClC3 在人肺癌及肺转移癌组织中普遍表达,并且可能与肺癌TNM分期相关.
【关键词】 肺癌;蛋白质ClC3;免疫化学;氯化物通道
0引言
肺癌是人体内最常见的恶性肿瘤之一,其突出的病理学特征是浸润临近肺组织和发生远处转移,使治疗失败或复发. 因此,弄清肺癌细胞的浸润机制,寻求有效的治疗措施,是当前临床和基础研究的重要课题. 肺癌细胞浸润过程涉及许多因素,其中由Cl通道(chloride channel) 介导的细胞形状容积改变赋予细胞的“主动”浸润潜能学说近年来很受关注. ClC3是一种电压门控Cl通道,主要分布于细胞内细胞器的脂膜中. 近年研究认为,ClC3参与调节性容积回缩(regulatory volume decrease, RVD) ,可能参与肺癌细胞的调节性体积改变,.freel厚的连续切片. Trizol 试剂(购自Invitrogen 公司) ;ClC3 抗体(购自Santa Cruz公司) ;免疫组化超敏UltrasensitiveTMSP试剂盒,DAB显色试剂盒均购自福州迈新公司. 人肺腺癌A549细胞系由上海医药工业研究所惠赠;IMP2型倒置生物学显微镜购自日本OIympus公司.
1.2方法免疫组化SP染色检查ClC3的蛋白表达. 空白对照采用PBS 代替一抗. 结果判断: 每张切片均有2位病理科专家分别随机观察具有代表性的10个高倍视野,根据胞膜和胞浆颜色程度及染色细胞的百分率(%)进行评分,基本不着色0分,着色淡者为1分,着色适中者为2分,着色深者为3分,着色细胞占计数细胞百分率≤5%为0分,6%~25%为1分,25%~50%为2分,≥51%为3分,将每张切片着色程度得分与细胞百分率的分相乘为其最后得分,0~1为阴性(-),2~3为弱阳性(+),≥4为强阳性(). 正常肺组织及不同分期肺癌ClC3阳性染色的例数百分数为阳性率.
统计学处理: 阳性率用%表示,组间比较应用SPSS11.0软件进行检验.
2结果
2.1肺癌中ClC3蛋白的表达ClC3蛋白主要表达在癌细胞和微血管内皮细胞的胞质或胞膜上(图1) . 在10例正常肺组织中ClC3表达阴性. 在76例肺癌标本中69 例ClC3表达阳性(90.8%),强阳性43例(56.6%),弱阳性26例(34.2%),阴性7例(9.2%),ClC3蛋白表达与性别、年龄及组织学分型未见一定关系(P 0.05).
A:正常肺组织;B:肺腺癌Ⅱ期;C: 肺鳞癌Ⅲ期;D: 肺腺癌Ⅲ期;E: 肺转移性鳞癌.
图1肺癌中CLC3蛋白的表达×400(略)
2.2ClC3蛋白
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