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　　cyclinE、CDK2在子宫平滑肌肿瘤中的表达论文 【关键词】 cyclinE；CDK2；子宫平滑肌肿瘤 子宫平滑肌肿瘤（uterine smooth muscle tumors, USMTs）是妇女最常见的肿瘤。细胞周期素（cyclinE）是G1期的周期蛋白，与细胞周期素依赖性激酶2（CDK2）在G1期末结合而发挥作用，促进细胞进入S期。近年来，在多种肿瘤的研究中发现有cyclinE、CDK2表达的异常，但其在USMTs中的研究，国内文献尚未见报道。增殖细胞核抗原（PA）是反映细胞，特别是恶性肿瘤细胞增殖活性的一个指标。本研究拟通过免疫组织化学方法探讨cyclinE、CDK2及PA在USMTs中的表达及临床意义。 1 资料与方法 1.1 临床资料 选取华中科技大学同济医学院附属同济医院病理科1992年7月～2004年10月存档的因USMTs而手术切除子宫的蜡块标本75例，其中.freelyoma, UL）35例，交界性子宫平滑肌瘤（borderline leiomyoma, BLM）22例，子宫平滑肌肉瘤（leiomyosara, LMS）18例。 于手术室另取正常子宫平滑肌组织（Myometrium, M）20例，4%多聚甲醛固定，石蜡包埋常规处理。 1.2 试剂 鼠抗人cyclinE单克隆抗体，工作浓度1∶100；鼠抗人CDK2单克隆抗体，工作浓度1∶50；鼠抗人PA单克隆抗体，工作浓度1∶50，均为美国Santa Cruz公司产品，购于北京中山生物工程公司。SP试剂盒与DAB显色试剂盒均为Zymed公司产品。 1.3 方法 采用免疫组织化学SP法分别检测UL组、BLM组、LMS组及M组的cyclinE、CDK2及PA蛋白表达。以磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作为阴性对照，微波炉抗原修复，DAB显色。 1.4 染色结果的判断 cyclinE、CDK2及PA均以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性染色。 1.5 图像分析 应用HMIAS2000型全自动彩色图象分析系统对各组切片进行分析，每组随机选取30个视野（20×物镜），分别测定每个视野下阳性染色的面积，平均光度及积分光度。 1.6 统计分析 用SPSS10.0软件包行t检验及Spearman等级相关分析，检验水准a＝0.05。 2 结果 2.1 cyclinE、CDK2及PA在各组中的染色 cyclinE及CDK2在USMTs中的表达，大多定位在细胞核内，少数在胞浆。而PA在USMTs中的表达，几乎均在细胞核内，图略。 2.2 cyclinE、CDK2及PA在各组中的染色面积 cyclinE、CDK2及PA在UL组的表达（1531.6±373.9、1776.9±264.3、2576.9±247.4）均明显高于M组（643.9±174.2、538.1±134.7、946.2±205.9），P 0.05；其在BLM组的表达仅CDK2在BL组（1623.4±244.6）低于UL组（1776.9±264.3），其余均高于UL组，但差异无统计学意义，P＞0.05；而其在LMS组的表达（5511.7±520.4、5335.3±452.8、6174.6±498.5）均明显高于UL组及BLM组（2078.8±305.5、1868.5±266.7、3072.1±304.7），P 0.05。 2.3 cyclinE、CDK2及PA分别在各组USMTs中的染色平均光度 cyclinE、CDK2及PA三个指标在UL组的表达（0.138±0.015、0.129±0.020、0.163±0.018）均明显高于M组（0.053±0.002、0.069±0.006、0.077±0.005），P 0.05；其在BLM组的表达（0.157±0.016、0.138±0.022、0.181±0.023）均高于UL组，但差异无统计学意义，P＞0.05；而其在LMS组（0.259±0.031、0.238±0.026、0.288±0.033）的表达均明显高于UL组及BLM组， P 0.05。 2.4 cyclinE、CDK2及PA在USMTs中的相关性分析 cyclinE、CDK2及PA在正常子宫肌组织中的表达均无明显相关关系；在UL组及BLM组随着PA表达的增加，cyclinE、CDK2的表达也相应增加，但只有cyclinE的表达与PA之间呈正相关（r=0.563，P 0.05），其余均无统计学意义，P＞0.05；在LMS组cyclinE与CDK2，cyclinE与PA，CDK2与PA之间均呈正相关，相关系数分别为：r=0.517，P 0.05；r=0.623，P 0.05；r=0.461，P 0.05。 3 讨论 3.1 PA的表达与USMTs的关系 PA亦称细胞周期素，作为D