DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析论文.docVIP

　　DNA分子标记在中药鉴定中的应用及发展趋势分析论文 李力， 徐永莉， 张月云， 赵成坚 【摘要】 目的对DNA分子遗传标记技术在中药材鉴定领域的应用作一综述。方法通过查阅20世纪90年代以来发表的文献进行归纳分析。结果DNA分子遗传标记技术具有微量、快速、特异性强、准确可靠、对样本要求较低的特点；使用较多的方法主要有RAPD、ISSR、ITS标记以及rRNA基因序列分析技术。同时，DNA分子标记技术也存在着使用局限、对实验硬件和从业人员的技术要求高、成本较高、技术复杂度高、对不同部位入药的药材仍然难以区分以及无法用于成药、复方、提取液鉴定等弱点。结论DNA分子遗传标记作为中药材鉴定的方法还有待发展和完善。 【关键词】 DNA分子遗传标记； 中药材； 鉴定 Abstract：ObjectiveThe paper summarizes the researches of application of DNA molecular markers in Chinese medicinal materia.MethodsInduction and analysis ents for the sample. Random amplified polymorphic DNA (RAPD),inter-simple sequence repeat (ISSR), interial transcribed spaoers (ITS) and rRNA gene sequencing technology are often used.Hoe disadvantages that employees are required special skills,the cost is high and the technique is plicated,edicinal materia used medicinally and identify patent medicine, Chinese medicine plex prescription and the extract of Chinese medicinal materia. ConclusionThe methods of Chinese medicinal materia identification by DNA molecular markers need to develop and improve. Key olecular marker； Chinese medicinal materials； Identification 针对我国药材种类繁多,来源复杂且品种混淆情况严重的状况, 为了保证临床用药的安全及质量和疗效,.freelple sequence repeat ISSR)和AFLP(Amplified restriction fragment Polymorphism)。第3类是以DNA序列为核心的分子标记技术,其代表性技术有ITS(interial transcribed spaoers)测序分析技术。本文仅就最近十几年来DNA分子标记技术在中药鉴定方面的应用作一分析， 并就其应用前景进行讨论和展望。 1 经典的DNA分子标记技术 此类技术的代表是限制性片断长度多态性 (Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP)。 RFLP是最早发展的分子标记，是由Bostein首先提出.freelan最先应用于品种鉴别和品系纯度的测定，这是最早发展的分子标记技术。其基本原理是利用限制性内切酶酶切不同个体基因组DNA后，与同位素或非同位素探针标记杂交，从而显示与探针含同源顺序的酶切片段在长度上的差异。RFLP探针的来源主要是RG克隆和cDNA克隆，其中cDNA探针保守性较强，许多同科物种cDNA探针都可以作为通用探针。在实际应用过程中，人们普遍感到经典的RFLP技术须经酶切、电泳、Southern转移、与探针杂交、放射自显影等步骤, 在实际应用中很不方便，费时费力,并受到探针来源的限制，多态性检出效率低(只能检测探针长度内切酶识别位点上的变异)。同时要求的DNA量较大,实验材料必须新鲜, 因此难以适用于干燥药材的鉴定,目前在中药鉴定领域已很少使用,已归为被淘汰的技术。 在多源性中药材如伞形科北沙参、柴胡,菊科苍术属豆科甘草属,羽扇豆属（Lupinus sp．），Yamazaki M,茄科澳茄属(Duborsia s ) Mizukami H,3种苍术Mizukami H的基原鉴定、资源分析及其地理品系(居群)间亲缘关系研究方面有了一些报道。 2 基于PCR的DNA分子标记技术 此类标记