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CTGF mRNA在糖尿病大鼠心肌中的表达及葛根素和氨基胍的调节作用论文.doc
CTGF mRNA在糖尿病大鼠心肌中的表达及葛根素和氨基胍的调节作用论文
【摘要】 目的 :观察结缔组织生长因子(CTGF)在糖尿病大鼠心肌组织中的表达情况及葛根素(Pue)、氨基胍(AG)对CTGF表达的调节作用。方法:给大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病模型,用葛根素(Pue1组,160 mg·kg-1·d-1;Pue2组,120 mg·kg-1·d-1;Pue3组,80 mg·kg-1·d-1)、氨基胍(AG组,100 mg·kg-1·d-1)治疗12周;采用RT-PCR检测心肌组织CTGF mRNA的表达,透射电镜下观察心肌细胞的形态学改变。结果:糖尿病组大鼠心肌组织CTGF mRNA的表达升高,Pue2组、Pue3组和AG组CTGF mRNA的表达明显降低;电镜下可见糖尿病组大鼠心肌细胞肌原纤维含量明显减少.freelg·kg-1·d-1)和氨基胍能下调CTGF mRNA的表达,对糖尿病大鼠心肌具有保护作用。
【关键词】 结缔组织生长因子;葛根素;氨基胍;糖尿病;心肌;基因;大鼠
Abstract: Objective: To observe the mRNA expression of the connective tissue groyocardial tissue in rats ellitus (DM) and the adjusling effects of puerarin (Pue) and aminoguantdine (AG) on CTGF expression.Methods: The diabetes mellitus (DM) rats models ade by intraperitoneal injection of streptozotocin (60 mg/kg body RNA of myocardial tissue ined erase chain reaction (RT-PCR). Morphology of myocardium of rats ission electron microscope (TEM). Results: The CTGF mRNA expres-sion g·kg-1·d-1、80 mg·kg-1·d-1)and AG treated groups (P 0.01). It shoyofibrilla contents in myocardial cell decreased significantly under TEM in diabetic group. The pathological changes of myocardium yocardium of diabetic rat may be doRNA expression.
Key inoguanidine;diabetes mellitus; myocardium;gene expression;rat
糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病最常见的慢性并发症之一,被认为是糖尿病死亡的首要因素。已有研究表明,糖尿病心肌病变以舒张功能异常为早期临床特征,间质纤维化是其发生的主要原因1。结缔组织生长因子(CTGF)是新近发现的与纤维化形成密切相关的细胞因子2。近年来有研究提示CTGF参与了心肌纤维化的发生3-4。本研究观察了CTGF在糖尿病大鼠心肌组织中的表达情况以及葛根素和氨基胍对CTGF mRNA表达的影响。
1 材料和方法
1.1 动物、试剂与仪器 清洁级(II级)Sprague-Daa公司产品,葛根素注射液(2 mL:0.1 g)为浙江康恩贝制药有限公司产品;Trizol reagent RNA提取试剂盒、RT-PCR试剂盒、DNA Marker由宝生物工程(大连)有限公司提供;CTGF及GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)引物序列由上海生物工程技术服务有限公司合成;血糖仪及测试条由强生(中国)医疗器材有限公司提供。
1.2 动物分组和处理 随机取10只大鼠作为对照组(C组),余60只大鼠禁食12 h后,用链脲佐菌素60 mg/kg一次性左下腹腔注射,72 h后取尾血用快速血糖仪测血糖,≥16.8 mmol/L为糖尿病大鼠。成模后再将糖尿病大鼠随机分为5组:糖尿病组(DM组)、葛根素高剂量(160 mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue1组)、葛根素中剂量(120 mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue2组)、葛根素低剂量(80 mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue3组)、氨基胍治疗组(AG组,100 mg·kg-1·d-1)。C组及DM组每天腹腔注射丙二醇,容积为2 mL/kg,其余各组大鼠每天在相同时间内腹腔注射相应的药物,于同等条件下饲养12周。大鼠给药
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