CD105、COX2和VEGF在结直肠癌中的表达及其与血管新生的关系论文.docVIP

　　CD105、COX2和VEGF在结直肠癌中的表达及其与血管新生的关系论文 蔡瑞霞，盛 霞，袁志浩，叶增强 【摘要】 目的 探讨结直肠癌中CD105在新生血管中的表达，环氧化酶（COX2)和血管内皮生长因子（VEGF）表达及其与血管生成的关系。方法 应用免疫组化SP法检测58例结直肠癌CD105表达的微血管密度，以及COX2、VEGF的表达。结果 58例结直肠癌中，CD105表达的MVD值为(36.50±9.59)，COX2和VEGF的阳性表达率各为69％和67.2％。COX2或VEGF表达阳性组的MVD值显著高于COX2或VEGF表达阴性组(P 0.05)。COX2和VEGF均阳性组的MVD值显著高于均阴性组(P 0.01)。COX2与VEGF表达显著正相关；COX2、VEGF表达均与MVD显著正相关（P 0.01）。结论 CD105是结直肠癌新生血管的特异性标记物.freel连续切片。免疫组化采用SP法。CD105和COX2均为鼠抗人单克隆抗体，购自北京中山生物技术公司。VEGF（鼠抗人单克隆抗体）及SP试剂盒购自福州迈新生物技术公司。 1.3 结果判定 CD105阳性判定以血管内皮细胞呈棕黄色为标准。微血管密度（Microvessel density, MVD）计数按VD值。VEGF和TGFβ1的阳性判定为10%以上的瘤细胞质和（或）细胞膜呈棕黄色者为标准。 1.4 统计学处理 MVD值以±s表示，采用SPSS 10.0软件包进行t检验和Spearman等级相关分析，P 0.05有统计学意义。 2 结果 2.1 CD105和COX2、VEGF在结直肠癌中的表达 CD105显示的新生血管分布不均匀，大多局限于肿瘤实质边缘的间质（见图1）。新生血管呈点、线、簇状结构，有管腔样结构形成，腔不规则，壁薄无平滑肌形成，癌旁正常组织的血管内皮大多呈阴性，极少数血管呈微弱的阳性。 58例结直肠癌中，CD105表达的MVD为21.3～60.0，平均36.50±9.59。结直肠癌COX2表达阳性率为69.0％（40/58），阳性染色主要集中在癌细胞的胞质（见图2），血管内皮细胞、纤维细胞和平滑肌细胞亦有散在的阳性表达。VEGF在结直肠癌的阳性表达率为67.2％（39/58）,阳性染色主要位于癌细胞胞质内（见图3），且在肿瘤边缘的癌细胞表达较强，某些血管内皮细胞也有阳性表达。 2.2 COX2、VEGF表达与MVD的关系 结直肠癌组织COX2或VEGF表达阳性组的MVD值显著高于COX2或VEGF表达阴性组(P 0.05)。COX2和VEGF均阳性组的MVD值显著高于均阴性组(P 0.01)。表1 COX2、VEGF和MVD的关系注：两组间比较:*P 0.01，**P 0.05，***P 0.012.3 COX2、VEGF和MVD之间的相互关系 经Spearman等级相关分析发现，COX2与VEGF表达显著正相关（r=0.28, P 0.01）,COX2与MVD表达显著正相关（r=0.33, P 0.01）,VEGF与MVD表达显著正相关（r=0.27, P 0.01）。 3 讨论 20世纪70年代初，Folkman首先提出肿瘤血管生成的理论，认为肿瘤在新生血管形成以前，只能生长到1～2mm3,不会发生转移；在新生血管形成以后，肿瘤会成倍增长，转移的机会随之增加。现已公认，肿瘤血管生成是肿瘤生长和转移的必要条件。 微血管密度是衡量肿瘤血管生成的量化指标，一般应用FⅧAg、CD31、CD34来标记肿瘤血管。CD105基因位于人染色体9q34，其蛋白是一种同型二聚体的膜结合糖蛋白，分子量为180kd,是转化生长因子(TGFβ)受体复合物的成分之一，其功能是参与血管生成24。CD105是一种内皮细胞标志物，与其他内皮标记物不同，其仅在处于增殖状态的肿瘤组织血管内皮细胞上(即新生的血管内皮细胞)上强表达，而在正常的组织血管上无表达1。有文献研究表明，CD105检测肿瘤组织中的新生血管与CD34等比较，具有更高的特异性5,6。我们的研究结果表明，CD105表达的微血管大多分布于肿瘤实质边缘，新生血管呈点线状，管腔不明显，管壁薄弱，在正常组织血管无表达。说明CD105标记新生血管的特异性，其分布边缘的特点也提示可能与细胞周期有关7。 环氧化酶（COX）是催化花生四稀酸合成前列腺素的关键限速酶，其存在COX1和COX2两个亚型。COX2是一种诱导性即刻反应基因，大多数正常组织不表达，但在细胞因子、生长因子、癌基因及各种促癌因素的刺激下迅速上调，参与肿瘤的发生发展8,9。本研究发现，69.0％的结直肠癌组织COX2阳性表达，提示COX2参与结直肠癌的发生发展。另外，C