HPLC法测定加替沙星聚乳酸纳米粒的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定加替沙星聚乳酸纳米粒的含量论文 邓红,梁健健,张蜀,陆尚移 【摘要】 目的 建立加替沙星聚乳酸纳米粒的含量测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，色谱柱为ODSC18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为0.02 mol/L枸橼酸溶液(内含0.6%三乙胺) 甲醇(体积比60∶40)，检测波长290 nm，流速 1.0 mL/min，进样量 20 μL。结果 加替沙星在4.010～60.15 μg/mL范围内浓度与峰面积线性关系良好(r=1.000)，平均回收率为100.2%，RSD为0.88%(n=9)。结论 建立的方法可用于加替沙星聚乳酸纳米粒的含量测定。 【关键词】 聚乳酸纳米粒；加替沙星；高效液相色谱法；含量测定 Abstract:Objective To establish a RPHPLC method for the determination of gatifloxacin in gatifloxacinpolylactic acid nanoparticles.Methods The analysis ed on an ODSC18 column (150 mm×4.6 mm, 5 μm) using 0.02 mol/L citric acid (0.6% triethylamine)methanol (60∶40) as mobile phase under the floL/min. The detection .Results Gatifloxacin had a good linear range of 0.0802～1.2030 μg (r=1.000). The average recovery rate ethod can be used to detect the content of gatifloxacin in the nanoparticles. Key ate型液相色谱仪，PDA3000型检测器，CHROMELEON 色谱工作站（美国戴安公司）；CP225D电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；KQ100超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；HonsilC18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm，迪马公司)；流动相：0.02 mol/L枸橼酸溶液(内含0.6%三乙胺)甲醇(体积比60∶40)；检测波长：290 nm，流速： 1.0 mL/min，柱温：室温，进样量：20 μL，理论塔板数按加替沙星计算大于2 000。 2.2 溶液的配制 2.2.1 对照品溶液的配制 取加替沙星对照品约20 mg，精密称定,.freelL量瓶中，加0.02 mol/L枸橼酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液（实际配得浓度为0.2005 mg/mL的贮备液），精密量取1 mL，置10 mL量瓶中，加0.02 mol/L枸橼酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得。 2.2.2 供试品溶液的配制 取加替沙星聚乳酸纳米粒样品适量，研细，精密称定（约相当于加替沙星1 mg），置50 mL量瓶，加0.02 mol/L枸橼酸溶液适量，超声振摇15 min使溶解，再加0.02 mol/L枸橼酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.2.3 空白辅料溶液的配制 按处方量称取辅料，照“2.2.2”项下方法制备，即得。 2.3 系统适用性试验 取上述的对照品溶液、供试品溶液及空白辅料溶液各20 μL进样，依法测定，记录色谱图（见图1）。可见，供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰的保留时间一致，辅料对测定无干扰。 2.4 线性关系考察 精密量取对照品贮备液适量于10 mL量瓶中加0.02 mol/L枸橼酸溶液稀释至刻度，配制成质量浓度分别为4.010、10.025、20.050、30.075、40.100、50.125、60.150 μg/mL的系列对照品溶液，分别进样20 μL，测定其峰面积，以对照品质量浓度（ρ/μg·mL-1）为横坐标,峰面积(A)为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为: A=1.5598ρ-0.0883（r=1.000）,结果表明在4.010～60.15 μg/mL范围内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系。 2.5 回收率试验 精密量取加替沙星对照品贮备液4.0、5.0、6.0 mL各3份，相应加入处方量辅料，分别置50 mL量瓶中,加入0.02 mol/L枸橼酸溶液适量，超声振摇15 min，再加0.02 mol/L枸橼酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过,分别取续滤液20 μL进样测定，记录色谱图。计算平均回收率为100.2%，RSD=0.88%，n=9，见表1。表1 加替沙星回收率试