MT1MMP在大肠癌中的表达及统计分析论文.docVIP

　　MT1MMP在大肠癌中的表达及统计分析论文 【摘要】 目的: 探讨膜型基质金属蛋白酶1(membrane type 1 matrixmetallo proteinase ，MT1MMP)在大肠癌中的表达及统计分析。方法: 收集武汉大学人民医院病理科2004～2009年有完整临床和病理资料的大肠癌存档蜡块40例和5例癌旁组织，采用免疫组织化学SP法检测40例大肠癌和5例癌旁组织中MT1MMP的表达水平。采用HPIAS1000 高清晰度彩色病理图文报告管理系统，对MT1MMP的表达进行定量分析，并用SPSS11. 5 软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q)检验。结果：MT1MMP在大肠癌中呈高表达，癌旁组织中呈低表达。大肠癌与癌旁组织相比，差异有显著性(P 0.05 )。结论：MT1MMP可能通过降解ECM参与肿瘤的侵袭和转移，检测MT1MMP的表达有助于预测肿瘤的转移,为治疗肿瘤提供了新的靶点。 【关键词】 大肠癌; MT1MMP; 免疫组织化学; 统计分析 近年来,随着人们生活水平的改善和生活习惯的改变,大肠癌的发病率在逐年增加。已由恶性肿瘤的第4位上升到第3位,发达国家如美国估计大肠癌死亡人数56290人,占全年癌症死亡总数的9.9%,仅次于肺而位居第2位1。但其发病机制尚不明确.freel组织切片常规脱蜡至水后，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×3 min;抗原修复(柠檬酸缓冲液微波抗原修复法)，室温自然冷却后，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗5×3 min;滴加3%过氧化氢，37℃湿盒孵育10min以抑制内源性过氧化物酶活性，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×3 min;正常羊血清37℃湿盒孵育10min以减少非特异性背景;甩去多余血清，分别滴加一抗，4℃孵育过夜，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×5 min;滴加生物素标记的二抗37℃湿盒孵育10min，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×3 min;滴加链霉素抗生物素蛋白过氧化物复合物37℃湿盒孵育10min，0.01M PBS(pH 7.4)漂洗3×3 min;滴加新鲜配置的DAB显色液显色，光镜下控制反应时间(约3～5 min)，自来水冲洗终止反应;苏木素复染，流水冲洗，1%盐酸酒精分色数秒，流水冲洗，0.1%氨水返蓝;梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片并镜检;用PBS代替一抗作为阴性对照组，购买的阳性片作为MT1MMP的阳性对照组。 1.2.3 免疫组织化学结果判断 MT1MMP以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性反应，阴性对照组除细胞核染成蓝色外，应无棕黄色反应物。 采用HPIAS1000 高清晰度彩色病理图文报告管理系统(同济千屏影像公司)对MT1MMP的表达进行定量分析，每张切片随机选取5个完整而不重叠的高倍镜视野(×400) ,测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积,计算阳性面积率(阳性面积率=单位面积中阳性反应的总面积/单位面积中细胞的总面积×100%)。以每例5个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值。 1.3 统计学处理 对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率作单因素方差分析和q 检验，检验水准α为0.05。 2 结果 2.1 MT1MMP的表达 大肠癌细胞胞浆内可见较多棕黄色颗粒, MT1MMP呈强阳性表达;癌旁组织细胞胞浆内可见少量的棕黄色颗粒，MT1MMP表达弱。图像分析结果显示：大肠癌MT1MMP的平均光密度为1.4728±0.0146;癌旁组织MT1MMP的平均光密度为0.5374±0.0095。大肠癌MT1MMP的阳性面积率为1.6577±0.0159;癌旁组织MT1MMP的阳性面积率为0.6410±0.0087。经q 检验，大肠癌与癌旁组织之间，MT1MMP的平均光密度及阳性面积率有显著性差异(P 0.05) 。见表1。表1 大肠癌和癌旁组织MT1MMP表达的平均光密度和阳性面积率注：* 大肠癌与癌旁组织比较，P 0.05。 3 讨论 大肠癌是最常见的消化系恶性肿瘤之一,虽然临床上对其可采取综合性的治疗措施,但其发病率和死亡率仍居恶性肿瘤的前列,.freelembranetype matrixmetalloproteinase，MTMMP)。基质金属蛋白酶(MMPS)是一组锌离子依赖性内肤酶，在正常组织中广泛表达，涉及组织重建、骨重建和塑型、怀孕和分娩、乳腺组织退化、组织浸润等重要的生理功能，在病理过程如风湿性关节炎、牙周炎、肾小球肾炎、冠心病等也有重要作用，尤其与肿瘤细胞侵袭、转移相关的细胞外基质降解和肿瘤新生血管形