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呼出气检测在肺癌诊断上应用现状及展望 　　摘要：呼出气检测是指通过检测呼出气中的挥发性有机化合物（Volatile Organic Compounds，VOCs），对疾病作出判断的方法。相比健康人群，肺癌患者呼出气中VOCs的成分存在着显著差异，通过检测VOCs诊断肺癌是一种新的诊断方法，具有无创、安全、敏感性和特异性较高、价格相对低廉的优势，有良好的应用前景 关键词：呼出气；检测；挥发性；有机化合物；肺癌 通过对呼出气的检测，人们可以获得更多信息。呼出气体检测通过检测人体呼出气体内相关的成分，从而对疾病的情况作出判断。肺癌患者的呼出气也有一些特征性的改变，对呼出气进行检测，有可能成为一种新型、无创、简便、经济、敏感的肺癌诊断方法 1.呼出气中挥发性有机化合物的定义 呼气中的主要成分为N2、O2、CO2、水蒸气和惰性气体，另外还有一些含量很低的被称为挥发性有机化合物（Volatile Organic Compounds，VOCs）的成分。其成分复杂，主要组分包括烃类、氧烃类、含卤烃类、氮烃类及硫烃类等 2.呼出气体中的VOCs的产生机制 人类呼出气体中已知存在的VOCs有500余种，它们可被分为外源性和内源性两类：内源性VOCs来源于人体血液中经由肺排出的代谢产物。其中具有诊断意义的内源性VOCs主要包括：饱和烃类（如乙烷，戊烷）、不饱和烃类、含氧有机化合物、含硫有机化合物和含氮有机化合物 动物实验及临床试验已证实呼出气体中的乙烷、戊烷的含量与脂质过氧化反应的活性之间存在着紧密联系，并可作为脂质过氧化反应的标志物。饱和烃类在血液中的溶解度较低，因此易挥发并由呼吸从肺部排出 呼吸气体中的不饱和烃类的代表主要是异戊二烯。动物实验发现其产生与肺泡表面活性物质的氧化损伤有关 呼吸气体中的VOCs产生与肺癌之?g的关联尚不十分明确。目前初步认为细胞癌变过程中增加了氧自由基的活动，这些氧自由基可引起蛋白质、多不饱和脂肪酸及DNA等的过氧化损伤，而细胞膜上的多种不饱和脂肪酸，通过脂质的过氧化反应，可转化为易挥发的烷烃类，如乙烷，戊烷等，这些烷烃类物质易通过呼吸气体排出。此外，这些烷烃物质也可通过细胞色素P450混合酶系统代谢，将其氧化成烷醇，排出体外。系列研究显示该酶系在肺癌患者中激活，导致氧化应激的代谢产物，如烷烃类和单甲基烷烃类的加速降解，并产生呼出气体相应成分的可测量的变化 3.VOCs的收集、浓缩与检测手段 VOCs的整个检测过程主要包括收集，预浓缩（吸附和解吸），分离检测以及数据后期定性定量分析这四大步骤 3.1气体收集 目前尚无公认标准的收集方法，主要是在操作中避免气体外漏和外界气体的污染。常用的方法有使用Breath CoHecfing Apparatus（BCA）或Bio-Vocbreath sampler采样，该方法对仪器和技术要求稍高。另外一种是直接向采样袋或采样容器内呼气，操作简便，无需特殊的收集仪器，但缺点是收集的气体中含有未经过肺泡中血气交换的死腔气体 3.2气体浓缩 人体呼吸中的VOCs气体含量极低，要求检测前对样本进行预浓缩。这一步骤可通过固相微萃取（solid Phase Micro.Extraction，SPME）、热解析等吸附技术来实现。SPME联合气相色谱分析（gas chromatographv，Gc）对VOCs的测定具有较高的敏感性和稳定性 3.3气体分析 VOCs经预浓缩后可通过加热使其脱附，再用气相色谱及质谱检测仪（mass spectrum，MS）进行定性和定量的分析l引。某一种VOCs很难与相关疾病建立直接的关系，而选取多种化合物所构建的VOCs模型在不同疾病之间以及疾病与正常状态之间则具有较明显的差异 气体的检测方法还有电子鼻，电子鼻是一种模拟人类嗅觉系统的智能电子仪器。电子鼻的优点是响应时间短、检测速度快、无需复杂的样品预处理过程 4.VOCs检测在肺癌诊断中的应用现状 与健康人群相比，肺癌患者呼出气中VOCs存在着明显差异，检测VOCs对肺癌的诊断有帮助，目前的研究显示需建立多种VOCs的联合检测诊断模型才能提高诊断的敏感性和特异性 呼吸气体检测应用于肺癌诊断的设想早期由O’Neill等提出，该学者鉴定出28种VOCs成分，主要是烷烃类：如己烷和甲基戊烷，以及苯的衍生物 1999年Phillip M筛选出22种VOCs，主要是烷烃类及其衍生物和苯的衍生物。2003年Phillip M和他的研究小组又从上述VOCs中挑选其中9种作为肺癌早期诊断或筛查的肿瘤标志物，并构建了相应的试验方法及预测的统计学模型。在2007年其所报道的实验性诊断研究中，结果显示采用共22种VOCs建立的模型，当敏感性为100%、