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第29卷第6期 大豆科学 VoL29No．6
2010钽 12月 SOYBEANSCIENCE Dec． 20lO
大豆花叶病毒的组织印迹与RT—PCR检测
战 勇1’2，喻德跃1
(1．南京农业大学大豆研究所，国家大豆改良中心，作物遗传与种质创新国家重点实验室，江苏南京210095；2．新疆农垦科学院作物研究
所。新疆石河子832000)
摘 要：用改进的组织印迹方法批量检测黄淮地区69份SMV样品，结果显示42个标样呈现非常清晰的蓝紫色阳
性反应，26个标样显色较弱而无法确证，1个标样呈阴性反应。进一步对图片进行600dpi扫描并放大200倍进行
分析，发现26个显色弱的标样中有25个呈阳性反应，1个标样显色很弱仍无法确证，使得检出率提高了37％。利
用RT—PCR程序对随机选取的8个样品进行验证，发现纯化与未纯化的RNA模板均能得到较为清晰的扩增条带，
而只有纯化后的PCR产物二次扩增才有预期的条带，且双酶切可产生245 3个预期的片段。
bp、255bp和307bp
表明改进的组织印迹方法能够用于批量、高效地检测SMV，而RT．PCR可用于更为精确的检验。
关键词：大豆花叶病毒检测；组织印迹；RT—PCR
中图分类号：$565．1 文献标识码：A 文章编号：1000．984l(2010)06-0915-05
and of MosaicVirus
Tissue RT-PCRDetection
Blotting Soybean
ZHAN
Yon91一，YUDe．yuel
for Geneticsand Centerfor Research
Enhancement，National Institute，
(1．NationalKeyLaboratoryCrop Germplasm SoybeanImprovement，Soybean
Research of andReclamation
University，Nanjing210095，Jiangsu；2．CropInstitute，XinjiangAcademyA咖culture Science，Shi—
NanjingAgricultural
hezi
832000，Xinjiang．China)
tissue SMV fromtheYellowandHuaiheRiverareasweredetected
Abstract：Withimprovedblottingapproach，69samples
theresultsshowedthat42 a clear couldnotmadeconclu·
and very reaction，26samples
samplespresented blue—violet—positive
for
sionforweakercolorandone was 600scanand the 200
samplenegat
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