银杏查尔酮合成酶基因启动子（GbCHSP）调控元件及功能分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2010 ，37 （12）：1919 –1928 Acta Horticulturae Sinica 银杏查尔酮合成酶基因启动子 （GbCHSP）调控 元件及功能分析 1,* 1,* 1,** 2 2 2 李琳玲 ，程 华 ，程水源 ，许 锋 ，王 燕 ，姜德志 1 2 （黄冈师范学院生命科学与工程学院，湖北黄冈 438000 ； 长江大学园艺园林学院，湖北荆州 434025 ） 摘 要：通过染色体步移方法从银杏（Ginkgo biloba L. ）基因组中克隆到查尔酮合成酶基因（CHS ） 翻译起始位点上游 1 711 bp 的启动子序列。生物信息学分析表明，该启动子片段中存在多个顺式作用元件， 包括紫外/蓝光响应单元、植物激素响应单元、真菌诱导元件、MYB 结合位点、TATA-box 和 CAAT-box 等。亚克隆了 CHS 转录起始位点上游 1 402 bp 序列，将其与 GUS 基因构建融合表达载体 pBI121 + CHSP， 以pBI121-35S 作为负对照，通过农杆菌（LBA4404 ）介导法分别转入烟草。结果表明，银杏 CHS 启动子 序列能驱动 GUS 基因在烟草中的表达，表达具有组织特异性。GbCHSP 的功能研究将有助于揭示银杏叶 黄酮的积累与 GbCHS 基因表达的分子机理。 关键词：银杏；查尔酮合成酶基因启动子；GUS；调控元件分析 中图分类号：S 664.3 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2010 ）12-1919-10 Regulatory Elements and Functional Analysis of Chalcone Synthase Gene Promoter from Ginkgo biloba L. 1,* 1,* 1,** 2 2 2 LI Lin-ling ，CHENG Hua ，CHENG Shui-yuan ，XU Feng ，WANG Yan ，and JIANG De-zhi 1 2 （College of Life Science and Engineering，Huanggang Normal University ，Huanggang ，Hubei 438000 ，China；College of Horticulture and Gardening ，Yangtze University，Jingzhou ，Hubei 434025 ，China） Abstract ：The regulative sequence （1 711 bp）of chalcone synthase gene promoter （CHSP ）from Ginkgo biloba L. was cloned by genomic walking. In silico analysis suggested that the sequence contained several typical cis-acting elements，including UV/blue light responsive elements，phytohormone responsive elements，fungal elicitor responsive elements，MYB binding site ，TATA-box and CAAT-box. A 1 402 bp promoter sequence upstream 5′ of translation start site of GbCHS