大豆class III酸性内切几丁质酶基因及其启动子表达方式.pdfVIP

中国油料作物学报 ２０１３，３５（２）：２２１－２２４ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＯｉｌＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅｓ ｄｏｉ：１０．７５０５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－９０８４．２０１３．０２．０１９ 大豆ｃｌａｓｓＩＩＩ酸性内切几丁质酶基因及其启动子表达方式  赵　艳，沙　伟 ，金忠民，张梅娟 （齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，遗传重点实验室，黑龙江 齐齐哈尔，１６１００６） 　　摘要：利用实时定量ＰＣＲ方法，检测大豆ｃｌａｓｓＩＩＩ酸性内切几丁质酶基因在大豆各组织中的表达，结果显示该 基因在大豆根、茎、叶中的表达活性低，而花和种子中的相对表达活性极高。利用ＰＣＲ方法，克隆大豆ｃｌａｓｓＩＩＩ酸 性内切几丁质酶基因５’端上游２０００ｂｐ序列，命名为ＣＰ。在线启动子预测软件分析，结果表明ＣＰ序列中含有多 种典型的种子特异表达元件和花特异表达的元件，如ＳＥＦ４ｍｏｔｉｆ、Ｅ－ｂｏｘ、Ｇ－ｂｏｘ、（ＣＡ）、ＡＡＣＡ、ＡＣＧＴ、ＣＣＡＡ；５２ ｎ －ｂｏｘ、ｎｔｐ３０３－ｂｏｘ、ＧＴＧＡ、ＴＡＣＰｙＡＴｂｏｘ。推测大豆ｃｌａｓｓＩＩＩ酸性内切几丁质酶基因启动子具有调控下游基因在花 和种子中大量表达的特性。 关键词：大豆；ｃｌａｓｓＩＩＩ酸性内切几丁质酶；启动子；克隆 中图分类号：Ｓ５６５．１０３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００７－９０８４（２０１３）０２－０２２１－０４ ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｏｆｓｏｙｂｅａｎｃｌａｓｓＩＩＩａｃｉｄｉｃｅｎｄｏｃｈｉｔｉｎａｓｅｇｅｎｅａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｒ  ＺＨＡＯＹａｎ，ＳＨＡＷｅｉ，ＪＩＮＺｈｏｎｇ－ｍｉｎ，ＺＨＡＮＧＭｅｉ－ｊｕａｎ （ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＧｅｎｅｔｉｃｓ，ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＡｇｒｏｆｏｒｅｓｔｒｙ，ＱｉｑｉｈａｅｒＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｑｉｈａｅｒ１６１００６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｏｆｓｏｙｂｅａｎｃｌａｓｓＩＩＩａｃｉｄｉｃｅｎｄｏｃｈｉｔｉｎａｓｅｇｅｎｅｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｏｙｂｅａｎｔｉｓｓｕｅｓ ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｒｅａｌ－ｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ（ＲＴＱ－ＰＣＲ）．Ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈｉｓｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｌｏｗｅｒｉｎ ｒｏｏｔｓ，ｓｔｅｍｓａｎｄｌｅａｖｅｓ，ｂｕｔｈｉｇｈｅｒｉｎｆｌｏｗｅｒｓａｎｄｓｅｅｄｓ．５’－ｆｌａｎｋｉｎｇｕｐｓｔｒｅａｍ２０００ｂｐｓｅｑｕｅｎｃｅｎａｍｅｄＣＰｏｆ ｓｏｙｂｅａｎｃｌａｓｓＩＩＩａｃｉｄｉｃｅｎｄｏｃｈｉｔｉｎａｓｅｇｅｎｅｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｓｏｙｂｅａｎｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｂｙＰＣＲ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅ ｖｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｉｓｆｒａｇｍｅｎｔｃｏｎｔａｉｎｅｄａｓｅｒｉｅｓｏｆｍｏｔｉｆｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｓｅｅｄ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｍｏｔｅｒｓａｎｄｓｏｍｅｐｏｌｌｅｎ－ｅｘ ｐｒｅｓｓｅｄｅｌｅｍｅｎｔｓ，ｓｕｃｈａｓＳＥＦ４ｍｏｔｉｆ，Ｅ－ｂｏｘ，Ｇ－ｂｏｘ，（ＣＡ），ＡＡＣＡ，ＡＣＧＴ，ＣＣＡＡ，５２－ｂｏｘ，ｎｔｐ３０３－ ｎ ｂｏｘ，ＧＴＧＡ，ＴＡＣＰｙＡＴｂｏｘ．ＩｔｗａｓｉｎｆｅｒｒｅｄｔｈａｔＣＰｐｒｏｍｏｔｅｒｃｏｕｌｄｄｒｉｖｅｄｏｗｎｓｔｒｅａｍｇｅｎｅｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｏｙ ｂｅａｎｆｌｏｗｅｒｓａｎｄｓｅｅｄｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｏｙｂｅａｎ；ＣｌａｓｓＩＩＩａｃｉｄｉｃｅｎｄｏｃｈｉｔｉｎａｓｅ；Ｐｒｏｍｏｔｅｒ；Ｃｌｏｎｉｎｇ