天花粉多糖的单糖组成与分子量测定论文.pdfVIP

首届中国中西部色谱学术交流会 2006年8月 天花粉多糖的单糖组成与分子量测定 黄晓兰，吴惠勤，黄芳，林晓珊 (中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室，广东广州，510070) 天花粉又名栝楼，是葫芦科植物栝楼(Trichosanth甜kirilowiiMaxim)的干燥块根。药理研究 表明，天花粉在增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗艾滋病毒方面具有很好的功效ll】，天花粉水提物得 到的天花粉多糖具有降血糖的活性【2】。天花粉与其它中药配伍组成的药物，具有明显的降血糖功效 胛J。因此，对天花粉多糖的研究已引起医药工作者的重视。 然而，目前有关天花粉多糖的成分分析研究很少文献报道【2。J。田庚元掣51从天花粉鲜汁中提取 出天花粉多糖，用气相渗透压法测得数均分子量为5200，经纸层析和气相色谱分析含阿拉伯糖和半 乳糖。对栝楼块根中的天花粉多糖的单糖组成及分子量的研究尚未见报道。本文采用气相色谱．质谱 分布等进行研究。本研究对进一步探讨天花粉多糖的药理作用，以及天花粉多糖的开发利用具有重 要的意义。 ’ 1 实验部分 1．1仪器与试剂 1．1．1仪器Agilent1100高效液相色谱仪，美国安捷伦公司；Agilent 质谱联用仪，美国安捷伦公司；721N型分光光度计，上海分析仪器厂。 ’ 毗啶、醋酸酐等试剂，AR级；试验用水，Millipore超纯水。 1．2天花粉多糖的提取 糖。用80％乙醇反复洗涤沉淀，于60℃水浴烘干得到天花粉结晶多糖。再经过SephadexG-50葡聚 1．3天花粉多糖的HPLC分析 2 1．3．1多糖的水解取500mg天花粉多糖，加入38mL 饱和Ba(OH)2溶液中和至中性，过滤，清液浓缩定容至10mL，进行HPLC分析。 1．3．2HPLC条件色谱柱：KromasilNil2 流速：1．2mL／min；示差折光检测器，恒温45℃；进样量：20此。 1．4天花粉多糖的GC—MS分析 ， 破坏醋酐，用氯仿萃取乙酰化产物，．萃取液浓缩定容至lmL，进行GC．MS分析。 基全项目：本文系广州市重点科技攻关资助项目(N02000J01001) 作者简介： 黄晓兰(1964-)．女。广东湖州人， 高级工程师。 主要从事药物厦食品分析工作． er-lU．1：wcnhxlli21cn．COE．Tel：020020 首届中国中西部色谱掌术交流会 2006年8月 1．4．2 0．2reX Gc—MS条件色谱柱：SE-30(15rex Gc墙接口温度280％：，．质量扫描范围(29-500)U。 、 1．5天花粉多糖的fiPC分析 1．5．1 GPC条件色谱柱：TSK-GEL 35℃；进样量：20pL。 1．5．2 38万、83．5万的多糖标样，用0．05mol／L 标作GPC的校正曲线。 1．5．3样品分析取一定量的天花粉多糖样品，用0．05mol／L 多糖峰的平均分子量及其分布。 ． 2结果与讨论 2．1天花粉多糖的HPLC分析 天花粉多糖水解后用高效液相色谱分析其单糖组成，并与单糖标样进行对照。天花粉多糖的高 效液相色谱图见图1。结果表明，天花粉多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、半乳糖组成， 其相对含量为鼠李糖：阿拉伯糖：果糖：(葡萄糖+半乳糖)=5．1：25．5：31．3：27．5。 圈l关花粉结量多糠的忡Lc色谱田 2．2天花粉多糖的GC-MS分析 ． 天花粉多糖水解并乙酰化后用GC-MS分析其单糖组成，将单糖