专题一 兽药毒理学试验和安全性评价.ppt

专题一 兽药的毒理学试验和安全性评价 一般毒性试验: 急性毒性试验 亚慢性毒性试验 长期毒性试验 特殊毒性试验: “三致”试验 致畸、致突变、致癌 第一节 一般毒性试验 一、急性毒性试验 (1)经口或注射给药的急性毒性试验 (2)经皮给药的急性毒性试验 目的： （1）求出受试物的半数致死量（LD50）。 （2）阐明受试物急性毒性的剂量-反应关系与中毒特征，为急救治疗措施提供依据。 （3）为受试物的毒性作出初步判断，为其它毒性试验设计提供依据。 经口或注射给药的急性毒性试验 1.动物 　小鼠（体重18～22g）、大鼠（体重180～200g） 或其他敏感动物。应注明动物的品系。每组小鼠不 少于10只、大鼠不少于6只，雌雄各半，雌性应未 产无孕。 2.供试药物的配制 一般用水为溶剂,将药物配成一定浓度的溶液. 3.给药方式与最大体积 灌胃法: 一次最大灌胃量 1.0ml/只(小鼠) 4.0ml/只(大鼠) 腹腔注射: 一次最大注射量 1.0ml/只(小鼠) 3.0ml/只(大鼠) 4.剂量与分组 预试验 全部致死的最小剂量LD100和全部存 活的最大剂量LD0 正式试验 5-7个剂量组,组间剂量呈等比级数, 其比值为1.2-1.4. 5.观察指标 动物一般健康状况，中毒表现和死亡过程。 时间：7天。 死亡动物：大体剖检、病理组织学检查（必要时） 6.LD50计算 寇氏法 计算供试药的LD50值及其95%可信限范围。 7.结果判定 大鼠一次经口LD50在1 mg/kg以下为极毒，1～50 mg/kg为剧毒，50 ～ 500 mg/kg为中等毒，500 ～ 5000 mg/kg为低毒，5000 mg/kg以上者为实际无毒。 小鼠腹腔注射敌百虫LD50计算表 计算LD50，代入下列公式： lgLD50=Xk - d（∑ Pi – 0.5) LD50 =Lg –1 [Xk - d（∑ Pi – 0.5)] 式中Xk 为最大对数剂量, ∑ Pi为死亡率的总和; d为相邻两组剂量比值的对数, d=lg1.2=0.0792 则: LD50 = Lg –1 [2.7938-0.0792(2.4-0.5)]= Lg –1 2.6433 =439.87(mg/kg) 经皮给药的急性毒性试验 1.动物 选用健康家兔（2.0～3.0 kg）、豚鼠(350～450 g)或 大鼠(200～300 g)，每组动物不少于6只，雌雄各半。 2.供试药物的配制 供试药物如是固体，应磨成细粉状，过120目筛，并用 适量水或无毒无刺激性赋型剂（橄榄油、羊毛脂、凡士 林等）混匀。如为液体，一般不要稀释。 3.给药方式 脱去动物背部脊柱两侧毛发（不得损伤皮肤），脱毛 后24小时检查皮肤，如无损伤才能进行试验。将供试药 物均匀地涂敷于脱毛区，不应少于动物体表面积的10%， 用塑料纸和两层纱布覆盖，再用胶布或绷带固定，以防 脱落和动物舔食。敷药24小时。试验结束后，用温水或 适当溶剂清除残留供试药。大鼠可采用浸尾方法给药。 4.剂量与分组 正式试验前，用少量动物做预备试验，根据24 小时内动物死亡情况，估计LD50的可能范围，以 确定正式试验的剂量。一般分为4个剂量组，组间 剂量呈等比级数。其比值为：1:1.5-3.0。若用赋 形剂，需设赋形剂对照组。 5.观察指标 观察动物的全身中毒表现和死亡情况，观察 时间为一周。若给药4天后仍有动物死亡时，仍 需继续观察一周，对死亡动物应做大体剖检，必 要时进行病理组织学检查。 6 . 结果判定 兔涂皮LD50在5 mg/kg以下为极毒，5～44 mg/kg为剧毒，44 ～ 350 mg/kg为中等毒， 350 ～ 2180 mg/kg为低毒，2180mg/kg以上者为 实际无毒。 二、亚慢性毒性试验 确定外来化学物质在动物1/10左右的生命时间 内，反复多次接触后有无引起损害的观测过程。 又称短期试验、亚急性毒性试验（Subchronic toxicity test）。 目的：1.毒性确定 2.靶器官 3.慢性毒性试验依据 试