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* 第二章 第二节 中医实验研究的思路 ? 3．小鼠四诊检测指标及方法 标准采集： （1）体重 （2）腋温（℃） （3）爪和尾显微数码拍照（计算机图像处理，提取反映红色程度的r值） （4）晚间35s旷场自主活动计数（跨格数的水平移动、前肢离地数的垂直移动） （5）瘤体积（cm，计算公式：abb/2，a代表肿瘤的长径，b代表肿瘤的短径） （6）估算瘤重（g，瘤重=瘤体积） （7）生存时间 结果 1．不同组别荷瘤小鼠生存情况 图2 所有荷瘤小鼠生存情况 2．荷瘤小鼠不同阶段四诊的演变 （1）总体上，荷瘤小鼠肿瘤体积呈持续增长；去瘤体重呈抛物线状，中晚期增长平缓）。 图3 所有荷瘤小鼠估算瘤重（g）增长情况 图4 所有荷瘤小鼠体重（g）增长情况 以上分别反映什么证候？ （2）荷瘤小鼠好奇和自主活动持续下降。旷场检测小鼠水平和垂直运动减少。 （3）荷瘤小鼠腋温持续下降，下降幅度大，严重时降幅达9%！ 图5 所有荷瘤小鼠旷场活动情况 图6 所有荷瘤小鼠腋温（℃）改变情况 以上分别反映什么证候？ （4）荷瘤小鼠爪、尾颜色变淡，反映红色程度的r值下降。其中，爪r的变化显著，严重时降幅达9.2%！ 图7 所有荷瘤小鼠爪、尾r值演变情况 以上反映什么证候？ 3．荷瘤小鼠不同阶段证候的演变 方法——各证型权重、辨证阈值及称谓 痰瘀邪盛=各小鼠瘤重/所有小鼠瘤重均数。大于1.5为邪毒甚，大于2为邪毒壅盛；小于0.75为邪较弱；0.5为邪弱。 阴虚程度=各小鼠正常或去瘤体重/正常组体重均值。小于0.9为阴偏虚，小于0.8为阴虚。 气虚程度=各小鼠水平移动数/正常均数×0.6+各小鼠垂直移动数/正常均数×0.4。大于1.5为气盛，小于0.5为气虚。 阳热程度=各小鼠校正腋温/正常均数×0.3+各小鼠爪校正r/正常爪r均数×0.5+各小鼠尾校正r/正常尾r均数×0.2。大于1.02为阳偏盛，小于0.98阳偏虚，小于0.95阳虚。 阳气程度=气虚程度×0.2+阳虚程度×0.8。大于1.1为阳气盛，小于0.85为阳气虚。 结果如下： （1）邪毒证候盛衰的演变 肿瘤增长的快慢标志着邪毒的盛衰。荷瘤小鼠肿瘤增长迅速者早期偏多，以后逐渐减少；肿瘤增长缓慢者所占比例逐渐增加，可能与存活时间较长的小鼠肿瘤细胞增生不活跃和体质较好有关。 图8 所有荷瘤小鼠肿瘤大小分布与演变 （2）不同虚证的发生及演变 与人类类似，随着病情的发展，荷瘤小鼠虚证出现的频率增加（为简捷明了，合并阴虚含阴偏虚、阳虚含阳偏虚、阳气虚含阳气偏虚）： 从不同虚证的程度看，气虚的程度最严重，其次是阳气虚。阳热下降恒定，但幅度小，阴虚则不一致，推测与实验后期所存活动物体质相对较好有关： 图9 所有荷瘤小鼠合并虚证的分布与演变 图10 所有荷瘤小鼠阴、阳、气虚演变情况 研究发现： 1）接种后的第7天，证候以邪毒为主，虚证无证可辨接近半数，虚证以单证居多。 2）接种后的第14天。总体进入中期，邪毒已不是重点，肿瘤体积居中的增加，并保持下去。阴虚和偏阴虚占16％，明显增加；气虚比例也显著上升；阳偏虚、阳虚的比例大幅上升，并均保持下去。对于阳虚如此高发，以往未见报道，可能是小鼠的特点。该阶段死亡以阳气虚为主要原因，因此，扶持阳气十分必要。此时阴虚多为气阴两虚、阴阳两虚，仅1例为单纯阴虚。 3）第18天，邪毒大多不甚；阳虚比例下降，可能与剩余动物体质较好有关；该阶段，单纯阴虚出现3例，有所增加。 4）第21天，该阶段小鼠出现大量死亡，集中在阳气虚、阴阳两虚。由于阳虚普遍发生，已无单纯的阴虚。 5）第25天，已进入晚期，该阶段小鼠出现大量死亡，集中在阳气虚、阴阳两虚。 6）第28天，该阶段小鼠出现大量死亡，集中在阳气虚。提示，晚期保护阳气的重要性。 7）第32天，阳虚减少，而阳气虚增加，提示气虚程度的严重。 （3）兼证及其演变 与人类类似，随着病情的发展，荷瘤小鼠虚证兼证的比例增加。趋势是无证可辨的数量和比例下降，单证的数量和比例下降；两证组合变化不大；而三个兼证组合者显著增加，四诊组合从无到有，有增加趋势： 图11 不同时期荷瘤小鼠证候比例的演变 4．荷瘤小鼠的预后 是否能在荷瘤小鼠出瘤的早期，依据其证候或体质，判断其预后？ 方法：求出同一日死亡小鼠不同证候的权重平均值，与生存天数比较。采用SPSS 11.5统计软件进行相关分析。 结果： （1）痰瘀邪盛