示差分光光度法.pptVIP

第七章 可见分光光度法 §7-1 概 述 §7-2 物质对光的选择性吸收 §7-3 光吸收的基本定律 §7-4 分光光度计简介 §7-5 分光光度法的建立 §7-6 分光光度法的应用 思考题 §7-1 概 述 一、吸光光度法 在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法。主要有: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围800nm?50?m 。 主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400 nm（近紫外区）。 可用于结构鉴定和定量分析。 §7-2 物质对光的选择性吸收 一、物质的颜色 物质的颜色是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收而产生的。 §12-4 分光光度计简介 一、主要部件 §12-5 分光光度法的建立 一、显色反应及显色条件的选择 1.显色反应 将试样中被测组分转化成有色化合物的反应。 配位化学反应：如：Fe3+与CNS-反应 氧化还原反应：如：Mn2+转化MnO4- 参比溶液的选择一般遵循以下原则： §12-6 分光光度法的应用 ____示差分光光度法 一、示差分光光度法（示差法）原理 示差法需要较大的入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。 设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cscx)。则： Ax= ?bcx As= ?bcs ΔＡ＝Ａx －Ａs = ?b(cx－cs）= ?bΔc 第十二章 可见分光光度法思考题 1．朗伯-比耳定律的物理意义是什么？写出其数学表达式。 2．摩尔吸光系数ε的物理意义是什么？其大小与哪些因素有关？ε在分析化学中有何意义？ 3．什么是吸收曲线？什么是标准曲线？它们有何实际意义？ 4．显色反应如何选择？ 5．吸光度测量条件如何选择？ 6．光度分析法中，参比溶液应如何选择？ 7．示差光度法的测定原理是什么？如何用示差光度法进行定量分析？ 答案 2.显色剂 在显色反应中与被测组分生成有色化合物的试剂。 无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等。 有机显色剂：如三苯甲烷类有铬天青S、二甲酚橙等；偶氮类有偶氮胂Ⅲ、PAR等。 3.有机显色剂的特性 与金属离子生成极其稳定的螯合物 选择性和灵敏度高 应用广泛 其特性与有机显色剂的分子结构有密切的关系： （1）生色团（发色团）： 能吸收紫外-可见光的基团 有机化合物：具有不饱和键和未成对电子的基团,具有n电子和π电子的基团产生n→ π*跃迁和π→π*跃迁跃迁E较低 例： C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N— （2）助色团：本身无紫外吸收，但可以使生色团吸收峰加强同时使吸收峰长移的基团 有机物：连有杂原子的饱和基团 例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X （3）红移和蓝移： 由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基）或采用不同溶剂后 吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移（长移） 吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移（紫移，短移） （4）增色效应和减色效应 增色效应：吸收强度增强的效应 减色效应：吸收强度减小的效应 （5）强带和弱带： εmax105 → 强带 εmax103 → 弱带 4、选择显色反应时应考虑的因素： 1）灵敏度高 2）选择性高 3）生成物稳定 4）显色剂在测定波长处无明显吸收，与有色 物最大吸收波长之差（对比度），应满足 ?? 60nm。 5、显色条件的选择 （1）显色剂用量： 固定待测组分 的浓度和其他条件 只改变显色剂浓度 测定吸光度。做A-剂用量 cR的关系曲线如图。 选择曲线变化平坦处作为显色条件。 （2）溶液的pH值 固定待测组分的浓度和其他条件只改变溶液的pH值测定吸光度。做A-pH曲线，选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的pH范围。 吸光度与显色剂用量关系曲线 cR cR cR A A A （3）显色温度 固定待测组分的浓度和其他条件只改变反应温度，测定吸光度。做A-T曲线，选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的温度范围。 （4）显色时间及稳定时间 固定待测组分的浓度和其他条件只改变反应的时间，测定吸光度。做A-t曲线，选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的时间范围。 pH A 图12-9 吸光度与pH关系曲线 二、干扰的消除 1.加入掩蔽剂 　　选择掩蔽剂的原则