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动物实验基本知识与动物实验基本操作技术 动物实验基本操作技术 一、实验动物的捉拿和固定方法 二、实验动物的编号方法 三、实验动物的给药方法 四、实验动物的麻醉方法 五、实验动物的去毛方法（自学） 六、实验动物的取血方法（自学） 七、实验动物的处死方法（自学） 一、实验动物的捉拿和固定方法1. 小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上， 在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。 2. 大 鼠 大鼠凶猛，实验时可戴帆布手套，用右手将大鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果大鼠后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作。 手术或解剖——固定板 取尾血或尾静脉注射——固定盒 3. 家兔 一手抓住兔颈部的被毛与皮肤，另一手托其臀部或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上。 家兔麻醉后固定方式分仰卧位和俯卧位，仰卧位固定时，四肢用粗棉线固定，头用家兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿后再固定在家兔台头端铁柱上；进行头颅部手术时，多采用仰卧位固定配合马蹄形固定器进行固定。 4. 蛙和蟾蜍 用左手将动物贴紧在手掌中，并以左手中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、右前肢，右手进行操作。根据实验需要，可用图钉，采取俯卧位或仰卧位固定在蛙板上。抓取蟾蜍时，禁忌挤压两侧耳部毒腺，以免毒液射入眼中。 二、实验动物的编号方法 染色法 耳缘剪孔法 挂牌法 烙印法 1、染色法：浅色动物 3～5％苦味酸溶液（黄色） 0.5%中性红或碱性品红溶液（红色） 2％硝酸银溶液（咖啡色，涂后光照10分钟） 煤焦油乙醇溶液（黑色） 甲紫（龙胆紫）溶液（紫色） 小鼠的编号方法 编号原则：先左后右，从前到后 2、耳缘剪孔法：小型动物 3、挂牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大型动物 4、烙印法：刺号钳，中、大型动物 三、实验动物的给药方法 1. 注射法给药 2. 摄入法给药 3. 涂布法给药 家兔耳缘静脉注射 将动物固定于实验台上，剪去耳缘部位的被毛，用乙醇轻轻擦拭，耳缘静脉即清晰可见。用左手食指和中指夹住静脉近心端，拇指和小指夹住耳缘部分，以左手无名指和小指放在耳下作垫，待静脉充盈后，右手持注射器使针头尽量由静脉远心端刺入，顺血管方向平行、向心端刺入约1cm。 注射完毕抽出针头，用棉球压迫注射部位数分钟，以免出血。 尾静脉注射 鼠尾静脉有3根，两侧及背侧各1根，左、右两侧尾静脉较易固定，应优先选择。注射时，先将鼠固定在鼠筒内或扣在烧杯中，露出尾部组织，用45～50℃温水浸泡鼠尾l～2 min或用75％乙醇溶液反复擦拭，以达到消毒、扩张血管和软化表皮角质的目的。注意药液推入静脉时是否通畅， 若阻力较大，注射部位皮下发白，表示针头未刺入静脉内，应换部位重新注射； 若推入药液顺利无阻，则表明已刺入静脉内，应把针头和鼠尾固定好，不要晃动，缓缓将药液推入，注射完毕，用棉球在注射部位轻轻揉压，使血液及药液不致回流而漏出。 2、摄入法给药 自动口服给药 强制灌胃给药 经直肠给药 小鼠、大鼠灌胃法 器械： 灌胃器 由注射器和特殊的灌胃针构成。 小鼠灌胃针长4～5cm 直径1 mm 大鼠灌胃针长6～8cm 直径1.2mm 小鼠灌胃法 按正确方法用左手抓取和固定动物。使腹部朝上，颈部拉直 固定后，右手持持接灌胃针的注射器吸取药液（或事先将药液吸好），将针头从口角插入口腔内，然后用灌胃针头压其头部，使口腔与食管成一直线，再将灌胃针头沿上腭壁轻轻进入，转动针头刺激动物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若动物挣扎厉害，应退出后灌胃针，待动物安静后重新插入。切不可强行插入，以免损伤食道或误入气管导致动物死亡。 当感觉有落空感时表明灌胃针可能进入胃内，向外抽动注射器活塞，感觉有负压说明灌胃针未插入气管，此时可将药液灌入。 成年小鼠插管深度一般是：3cm 小鼠灌胃量：0.1～0.3ml/10g体重 大鼠灌胃法 兔灌胃法 器械： 灌胃管（特制胃管或导尿管） 开口器（木质纺锤状） 兔灌胃法 操作方法： 1.固定 2.插管 3.给药 兔灌胃法 操作方法： 1.固定：动物取直立或平卧体位，固定动物头部。 直立位需2人合作，一人取坐位，将兔的躯体和下肢夹在两腿之间，左手紧握双耳固定头部，右手抓住前肢，将兔固定于竖立体位。另一人将开口器横放于兔口中，让动物咬住