反相高效液相色谱法测定巴洛沙星有关物质的方法学研究论文.docVIP

　　反相高效液相色谱法测定巴洛沙星有关物质的方法学研究论文 .freelm×4.6mm，5μm)， 流动相为乙腈-0.4%十二烷基硫酸钠溶液(47：53)［用枸橼酸（1.5mol/L）调pH值至3.0］，检测波长为295nm，流速为1.0ml/min。结果 巴洛沙星与各有关物质在上述色谱条件下能有效地分离。结论 该方法结果准确、操作简单、灵敏度高、专属性强，适用于巴洛沙星的有关物质测定。 【关键词】 巴洛沙星；反相高效液相色谱法 Study on determination of related substances in balofloxacin by RP- HPLC 【Abstract】 Objective The reversed phase high performance liquid chromatography method ine the related substances in balofloxacin.Methods The column is SMT C18(250mm×4.6mm×5μm).The mobile phase is pound solution of acetonitrile and 0.4% lauryl sodium sulfate(47：53)［adjusted pH to 3.0 by citric acid(1.5mol/L)］， the detection ， the flol/min. Balofloxacian and all of the related substances can be separated efficiently ineation of the related substances in balofloxacin. The column is SMT C18(250 mm×4.6 mm.freel).The mobile phase is pound solution of acetonitrile and 0.4% lauryl sodium sulfate(47：53) ［adjusted pH to 3.0 by citric acid(1.5mol/L)］， the detection ， the flol/min. Results Balofloxacian and all of the related substances can be separated efficiently ethod is accurate， simple ，rapid and exclusive.Conclusion It could be used for determination of related substances in balofloxacin. 【Key ance liquid chromatography 巴洛沙星(balofloxacin)系由日本中外制药株式会社与韩国Choongol/L柠檬酸-乙腈（60：40）［三乙胺调pH=4］的反相液相色谱法测定主要中间体羧酸乙酯在巴洛沙星中的含量。本实验通过摸索新的色谱条件，采用乙腈-0.4%十二烷基硫酸钠溶液为流动相的高效液相色谱法，能同时测定了巴洛沙星的合成中间体羧酸乙酯、螯合物Ⅰ及螯合物Ⅱ。该方法简单准确、分离效果好，对巴洛沙星的质量控制具有明显的实用价值。巴洛沙星及各中间体的结构式如图1所示。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 高效液相色谱仪—T C18柱（5μm，4.6mm×250mm）；流动相：乙腈-0.4%十二烷基硫酸钠溶液(47：53)［用枸橼酸（1.5mol/L）调pH值至3.0］；检测波长：295nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温；进样量：20μl。 2 结果与讨论 2.1 测定波长的选择 分别称取巴洛沙星及各中间体适量，分别加乙腈溶解制成每1ml中约含6μg的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录ⅣA)，在200～400nm的波长处扫描，结果显示巴洛沙星在295nm处吸收最强，且其他中间体在295nm附近有较大的吸收，故选择295nm为本品有关物质测定的检测波长。 2.2 色谱柱及流动相的选择 色谱柱：(1)DiamonsilTM C18柱（5μm， 4.6mm×200mm）；(2)Kromasil C18柱（5μm， 4.6mm×200mm）；(3)SMT C18柱（5μm， 4.6mm×250mm）。流动相：(1)参照中国药典2000年版二部沙星类药物有关物质测定，采用流动相：乙腈-0.05mol/L枸橼酸溶液(20： 80)［用三乙胺调pH值至3.5］；(2)乙腈—0.4%十二烷基硫酸钠溶液（47