吸氧预处理诱导的大鼠脑内Fos表达论文.docVIP

　　吸氧预处理诱导的大鼠脑内Fos表达论文 张西京，熊利泽，王曦，胡文能 【关键词】 氧疗 【Abstract】 AIM: To investigate ic tolerance induced by oxygeninhaling preconditioning. METHODS: SD rats ly divided into 2 groups: oxygeninhaling preconditioning group and control group (n=6 each). The rats in oxygeninhaling preconditioning group inhaled Pure oxyen for 24 h, als inhaled 210 mL L-1 Pure oxgen for 24 h. 24 h after the treatment, all the rats oved out. The Fos expression in rat brain munohistochemistry method and the difference betilar. Hoa, lateral parabranchial nucleus, caudal part of spinal nucleus of 5th nerve, ventrol tegmental nucleus, periaqueductal nucleus, supramammillary nucleus, supraoptic nucleus, hippocampus, subiculum,.freelygdaloid nucleus, anterior cortical amygdaloid nucleus, lateral septal nucleus, bed nucleus of stria terminalis, globus pallidus, Calleja island, occipital cortex, retrosplenial cortex, parietal cortex, forelimb and hindlimb area of cortex, and frontal cortex. CONCLUSION: Some nuclei can be activated by oxygeninhaling preconditioning. Oncogene cfos is involved in the regulation of the brain ischemic tolerance induced by oxygeninhaling preconditioning. 【KeyL L-1 O2 24 h. 24 h后经心灌流、取脑；用免疫组化法观察Fos蛋白在大鼠脑内的表达，比较两组大鼠的表达差异. 结果： Fos样免疫反应阳性神经元在脑内分布广泛，两组动物脑内的Fos阳性细胞的分布模式非常相似. 但吸氧预处理的大鼠脑内许多脑区Fos表达明显增多、增强. 结论： 吸氧预处理可激活脑内的一些核团；原癌基因cfos参与了对吸氧预处理诱导脑缺血耐受的调节. 【关键词】 氧疗；预处理；基因， fos；大鼠；脑 0引言 自1990年Kitagag kg-1）腹腔内注射，麻醉后开胸，经心脏灌注，先用9 g L-1生理盐水100 mL冲净血液，然后用预冷的40 g L-1多聚甲醛固定液400 mL灌注，先快灌200 mL，继之慢灌200 mL. 灌注完毕，取出全脑，40 g L-1多聚甲醛后固定2 h后，将脑放入200 g L-1蔗糖溶液，4℃过夜. 组织块完全沉底后用冰冻切片机连续冠状切片，隔4取1，片厚50 μm. 1.2.2免疫组织化学染色将脑片经10 mmol L-1 PBS漂洗，浸入800 mL L-1甲醇和3 mL L-1过氧化氢封闭30 min，10 g L-1牛血清白蛋白、30 mL L-1羊血清和3 g L-1 Triton X100封闭1 h，用ABC方法进行免疫组化染色：首先将脑片浸入兔抗Fos抗体（1∶3000，Santa Cruz Tec.），室温24 h；10 mmol L-1 PBS漂洗10 min×3次；再入生物素化的抗兔IgG抗体，室温4 h；10 mmol L-1 PBS漂洗10 min×3次；最后入生物素卵白素辣根过氧化物酶复合物（ABC, 1∶500，Sigma公司），室温2 h，10 mmol L-1 PBS漂洗10 min×3次. 用硫酸镍铵加强的DAB蓝色反应法进行呈色反应，当阳性产物呈深蓝色而背底几乎无色时终止反应，贴片，梯度脱水、透明、封片，光