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我的动物细胞工程
2.2 动物细胞工程 烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,那么如何来治疗该病人? 思考题 思考题 思考题 讨 论 如何实现动物细胞培养条件的? 1、无菌、无毒的环境 2、营养 3、温度和PH 4、气体环境: 动物细胞培养技术应用 a、生产生物制品 b、与基因工程相结合 c、有毒物质的检测 问题讨论 1、某植物非常具有观赏价值,你采取什么方法来繁殖后代,使它们继承该植物的全部优良性状? 2、1997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛,平均每年产量为十几吨,而我国平均水平仅有3-4吨。你能想办法繁殖卢辛达的后代,使年产奶量为30.8t吗? 克隆 1、什么是克隆? 1、动物的克隆与植物克隆一样吗? 思考题 4.动物克隆实例很多,为何多莉就举世闻名呢? 请归纳动物体细胞核移植概念: 将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 * * 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 核移植 常 用 技 术 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植 动物细胞培养: 就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 一、动物细胞培养 1、过程: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 (分解弹性纤维) 单个细胞 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 原代培养 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗? 2、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗? 3、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢? 4、如何将动物组织分散成单个的细胞呢? 5、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份? 没有 是 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖分散了做成细胞悬浮液利于培养 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质(胶原蛋白等) 思考题 6、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗? 7、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢? 8、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么? 9、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因? 能 注意时间的控制 不能,因为两的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 细胞生命力旺盛,分裂能力强 10、贴附性细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒? 易于培养细胞贴壁,进行生长增殖 12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖? 13、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办? 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养; 11、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 14、如何理解原代培养和传代培养? 15、传代培养的细胞能一直传代下去吗? 16、有些为何能一直传下去吗? 17、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?用于植皮的细胞培养应该不多于多少代? 上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养 不是都能 发生突变,朝着癌细胞方向发展 保存10代以内的细胞;因为10-50部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展;10代 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,认为培养动物细胞应该模拟细胞生活的什么环境? 无菌、无毒 全部的营养物质 适宜的温度和PH值 必要的气体条件 保证细胞顺利的生长增殖 如果有一天知道了细胞生长需要的各种成分,能否完全用人工合成培养基? (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) (糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。) 培养室中控制,使之达到 36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4 培养箱中提供 O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 获得细胞 或细胞产物 细胞的全能性 植物体 培养结果 快速繁殖\培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素
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