土壤基因组DNA提取试剂盒使用说明.pdfVIP

土壤基因组 D NA 提取试剂盒使用说明 货号：D2600 规格：50T/ 100T 保存：室温(15 ℃-25 ℃) 干燥保存，复检期 12 个月，2 ℃-8 ℃保存时间 更长。 试剂盒内容： D2600-50T D2600-100T 溶液 A 25ml 50ml 溶液 B 3ml 6ml 溶液 C 5ml 10ml 溶液 D 10ml 20ml 漂洗液 15ml 15ml ×2 洗脱液 10ml 20ml 吸附柱 50 个 100 个 收集管 50 个 100 个 PCR 增强剂 500ul 1ml 说明书 1 份 1 份 注：试剂盒开封后溶液 A 、B、C、D 需在 2-8 ℃保存。PCR 增强剂-20 ℃ 保存。 产品简介: 本试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种极端土壤环境中提取微生 物 DNA 。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果，最大限度的保留了微生 物 DNA 的多态性。 本试剂盒采用我公司特有的腐殖质吸附材料，可高效专一的去除各种腐 殖质成分而丝毫不会影响 DNA 的产率，纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。 使用本试剂盒提取的 DNA 产量大、完整性好，可直接用于各种常规操作， 包括酶切、PCR 、文库构建、Southern 杂交等实验。 操作步骤： 使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 1、称取土壤样本 0.1-0.5g ，在液氮中充分研磨成细粉末，加入 450ul 溶 液 A 震荡混匀。 * 也可直接称取样本 0.1-0.5g 于离心管(建议使用 2ml 圆底管)，加入 450ul 溶液 A 剧烈震荡混匀 1-2min 至没有固体块。 使用液氮研磨效果最 佳。 2、加入 50ul 溶液 B 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡)，65 ℃水浴 6min， 每 2min 充分颠倒混匀一次。 3、加入 100ul 溶液 C 充分颠倒混匀( 不要剧烈震荡)，12000rpm 离心 10min 。 4 、将上清转移到新的离心管，12000rpm 离心 2min 。 5、在吸附柱中加入 200ul 溶液 D ，将离心后的上清加入到带有溶液 D 的吸附柱中，用移液器吹吸几次混匀，12000rpm 离心 1min 。 6、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱( 必须)，12000rpm 离心 1min。 7、倒掉收集管中的废液，在吸附柱中加入漂洗液 500ul，12000rpm 离 心 1min 。 8 、倒掉收集管中的废液，重复步骤 7 两次(共漂洗三次) 。 9 、倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集