Halo柱的优势.docVIP

3 Halo柱的优势 （1）耐压性好，反压低 一般是40MPa(400bar，5800psi)通常上限6000psi，而HALO柱60 MPa，约9000 psi。 反压低是一个相对的概念。 能适用于常规液相色谱仪器，无需购买昂贵的超高压设备。 （2）柱效高 （3）柱稳定性好 (4)复杂化合物的快速分离 （5）峰形美观 （6）节省溶剂，利于环保 主要是柱子短、填料颗粒均匀、核壳型结构、反压又相对较低等原因使流动相流径短，从而节省了大量溶剂。下面做一个粗略计算： 色谱柱 规格 流速 分析时间 乙腈用量 节省的乙腈 乙腈用量/年 节省人民币/年 常规 C18柱, 5 μm ?4,6 x250 mm 1 mL/min ?43 min 15 mL ? 8箱(4x 4L)80箱(4x 4L) ? Halo C18柱, 2,7 μm 4,6 x100 mm 1 mL/min 10 min 3,5 mL 77% 2箱(4x 4L)20箱(4x 4L) 1.2万元12万元 以2010年某全球知名品牌的乙腈的市场公开报价（500元/瓶，4升装）作为参考，分析时间为之前的1/4，节省溶剂量达77%，按照一年两箱的用量，每年可节省人民币1.2万元,按照一年20箱的用量，每年可节省人民币12万元。 4 不同模式分离机理及应用 HaloC8/C18与普通的C8/C18，分离机理一样，但它比常规柱有以上优势，尤其体现在柱效和复杂化合物的方面，halo Uhplc比HALOC8/C18有更强的选择性，halo RP-Amide对酸性和碱性化合物的分离性能比HALOC8/C18更优越。且更实用于水溶性化合物和水比例高的流动相，主要是极性铵基的存在，也可用于100%的水相流动相，它的柱寿命较长，且非常适宜于质谱连用。 1 haloRP-Amide的分离机理及应用 比c18 选择性好。 在此类柱子上的分离易受烷基和带有氨基的氢键之间的疏水作用影响，对保留其主要作用的是嵌有氨基的氢键 一般来说，酸的保留性更好，碱性化合物保留性弱点儿，中性化合物的保留性能与haloC18的类似。当复杂化合物在C18上无法得到分离时，可采用此柱子分离。 2 halo Phenyl-Hexyl 它有不同的分离机理包括： 分析物上的自由电子和固定相上苯基之间的π-π键的相互作用 流动相和带有疏水性烷基-芳香基团的固定相之间的疏水作用 乙腈趋向于降能够低π-π键的相互作用，甲醇趋向于增强此作用，它能增强保留性能，改善选择性，因此在苯基柱上较多采用甲醇。 此类柱子由于苯基的存在，它对含有芳香基团的化合物有很好的分离性能，适用于水溶性化合物的分离，可用100%的水性流动相 3 halo HILIC COLUMN 它的分离机理较为复杂，常呈现以下作用的综合作用： 亲水作用、离子交换、和一些反相保留性能，极性表面的亲水层促进了极性溶剂的相互作用。 作为固定相，它的保留性能和反相的相反，由于其固定相极性较大，因此流动相可用水比例较高。经多次试验发现，梯度洗脱时，最初的流动相有机溶剂比例要高，在低流动相中，有机溶剂占70%以上，酸性和碱性化合物有最强的保留性，这款柱子较适合于质谱联用。尤其适用于极性化合物的分离，包括酸性。碱性化合物或在反相柱上无保留或保留性很不好的化合物，于质谱联用时灵敏度明显增强。 使用注意事项： 建议使用此类柱子时温度不要超过60°。 乙腈在此用作弱极性溶剂使用，为获得足够的保留性能，乙腈的使用比例范围是95%-60%，流动相中至少5%是强极性溶剂，例如：甲醇、水， 和反相一样，有机溶剂的类型可以改善保留性和选择性能 用溶剂强度从弱到强依次为： 四氢呋喃、丙酮、乙腈、异丙醇、乙醇、甲醇、水 用乙腈做梯度洗脱时，建议起始比例：90-95%，结束比例：50-60% 为了进一步增加保留性能，建议用强极性的甲醇或异丙醇代替一些水。 使用缓冲盐做流动相时，为获得最佳的柱效和重现性，缓冲盐的浓度建议在10-20 mM占流动相比例的0.5%，磷酸盐由于在高有机流动相中溶解性不好和质谱不匹配，一般不建议使用。在流动相中，像一些添加剂，甲酸、三氟乙酸、磷酸可达1%, 当与质谱连用时，在ph=3，分离酸性和碱性化合物时，挥发性的甲酸铵、蚁酸等的浓度可达20 mM, PH值大于6的缓冲盐和添加剂，由于可能会使硅胶基质缓慢溶解，一般不建议使用。样品溶剂应尽可能地与流动相的类型和轻度相近，样品溶剂和含有比流动相中有机溶剂比例高些，但是如果的极性溶剂高的话，峰形会受到影响，尤其对于先被洗脱的化合物，如果由于某种原因，样品不溶于流动相的，可用75/2的乙腈/甲醇试用。 强极性溶剂如二甲基甲酰胺、二甲亚砜常到时峰形较差，一般不建议使用。如果使用，应该用弱极性溶剂稀释，如乙腈。