新生小鼠神经干细胞体外培养、分化及鉴定.PDF

ao 第PV卷 第N期 OMNS年O 月 TN 新生小鼠神经干细胞体外培养、分化及鉴定 N OG 代丽丽 ，钟士江 NK 天津中医药大学，天津 PMMNVP OK 武警后勤学院附属医院，天津 PMMNSO 摘 要：目的 简化神经干细胞原代培养的取材及步骤，明确体外定向诱导分化条件，为进一步神经干细胞移植相关实验提 供基础条件。方法 新生OQ= 昆明种小鼠无菌条件下冰上取大脑组织，经机械分离加胰酶消化吹打后，加入含有碱性成纤 维细胞生长因子、表皮细胞生长因子和_OT 的ajbjLcNO 培养基中培养；加入不同浓度胎牛血清诱导其分化，应用免疫荧 光技术行巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、微管相关蛋白O 染色，对培养细胞鉴定。结果 新生小鼠提取神经干细胞可形成神经 球，并稳定增殖传代，经诱导可定向分化为神经元及星形胶质细胞。结论 新生小鼠较胎鼠取材简单，可培养高质量神经干 细胞，血清浓度同向星型胶质细胞方向的分化概率呈正相关。 关键词：神经干细胞；细胞培养；分化；鉴定 中图分类号：oVSR 文献标志码： 文章编号：NSTQJSPTS=EOMNSF=MN J=MMTN=J=MP alfW NMKTRMNLàKáKNSTQJSPTSKOMNSKMNKMNO f=I=~I~=~==~=== ~~= N OG af=iáJá Iwelkd=páJàá~ NKqá~àá=rááó==q~áá~=`á=jááIqá~àá=PMMNVPI `á~ OKáá~=eéá~===éá=iáá=`I qá~àá=PMMNSOI `á~ ~W=l q=áéáó==áá~=ìì==ì~== ~==á==áá~á=ááK má=~á=áá===ì=ìó==ì~===~é~~áK j q=~á=áì==hìá=á OQ=~=á~=ì=á=áá===áI=ó=~á~=é~~á=~=óéá=áá=~=áì~áI ~ ~=á=~~á=á~==~I=éá~==~I ~=_OT==ajbjLcNO=ìì=áìX q=~á=áì ~ ~=~=á=á=~á==~=á=ì áì=áá~áX q áì=ì=áì= áI=á~=áá~ó=~áá=éáI ~áìì=~á~=éá=O=~áá===ìì=ááá~á =~=éK o q=éá~ó=ìì====~~=á=ì ===ì=~=éá~=~=áá~=á=ì=~ ~óK `é~=á==~=~I===á~=áé=~=ì~== á=á=ì~áó ì= ììI=~==ì=~ááéááó=~=á==áá~á===áá===~óK h=Wì~==X=ììXáá~áXááá~á 神经干细胞（ì~==I kp`）是一种 研究采用干细胞移植治疗以恢复或重建受损的中枢 特定的干细胞，其基本生物学特性是自我更新能力 神经系统结构和功能xQz。神经干细胞治疗是一种重要 和向神经细胞多向分化能力，可在多种刺激因素下 的新型治疗方法，用于治疗神经系统损伤和退行性 分化为神经元、星型胶质细胞及少突胶质细胞xNJPz。 病变是近期研究热点xRz。本实验简化神经干细胞原代 根据神经功能受损的恢复机制、神经元的不可再生 培养的取材及步骤，明确体外定向诱导分化条件， 性、体内内源性神经干细胞数量稀少的原因，当代 为进一步神经干细胞移植相关实验提供基础条件。 收稿日期：OMNRJNNJNP 基金项目：经鼻给予kdc 联合kp` 移植治疗运动神经元病的实验研究（NPg`v_g`OQNMM） 作者简介：代丽丽，女，天津中医药大学，研究生在读。qW=NPMPOOPUNMO =bJ~áW=àá~óìá~]NSPK G通信作者：钟士江 （NVSO－），男，主任医师，教授，医学博士，博士后，硕士生导师，从事脑血管疾病及神经退行性疾病研究。 qW=NPNMOOVSMOV bJ~áW=áàá~N]NSPK TO ao 第PV卷 第N期 OMNS年O 月 N 材料和方法 S个浓度组，每组Q 个孔加入并标记，PT℃、RB`lO NKN 材料 条件下培养O= 后，MB组加入NMBc_p，P=后行免