不同产地白英中多糖含量的测定论文.docVIP

　　不同产地白英中多糖含量的测定论文 王林江，雷倩，马双良，汪晓敏，徐顺 【摘要】 目的测定不同产地白英多糖的含量，为白英的质量评价提供理论依据。方法利用水提醇沉法从白英中提取得到多糖，采用苯酚-硫酸法测定3个产地白英的多糖含量。结果不同产地白英多糖含量分别为:安徽1.66%，浙江1.84%.freel lyratum Thunb.系茄科植物，全草作为传统中药已有二千多年的历史，最早见于《本经》记载，多产于浙江、江苏、安徽，性味苦、辛、微寒。常与他药伍用治疗肺癌、胃癌、肝癌等多种癌症，此外还用于治疗感冒发热、黄疸性肝炎、胆囊炎、水肿等。白英的化学成分研究表明白英中含有黄酮类、多酚类、有机酸类、多糖类、倍半萜类、甾醇类、香豆素类等多种化合物［1］。 多糖是构成生命的基本物质之一，广泛存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中，是一类天然高分子化合物。随着对多糖结构的逐步深入了解，多糖化合物的生物活性研究得以迅速发展。多糖在抗肿瘤、免疫调节、抗衰老、降血糖及降血脂等方面显示出良好的应用前景［2，3］。白英中的多糖具有多种生物活性［4，5］，不仅可以作为广谱免疫促进剂具有调节免疫功能，还可以抗感染、抗辐射、抗凝血、降血糖、预防和治疗肿瘤等。植物多糖的含量可以在一定程度上体现该药材免疫作用的强弱。白英多糖是其主要成分之一［6，7］，但目前有关白英多糖的研究报道较少，不同产地白英多糖的含量比较也未见报道。本实验利用水提醇沉法从白英中提取得到多糖，采用苯酚-硫酸法［8，9］显色测定了3个不同产地白英中多糖的含量，为选取优良药用白英产地提供依据，为白英质量评价做出补充，也为其药理作用的进一步研究提供基础。 1 药材、试剂与仪器 1.1 药材安徽产白英购于北京同仁堂，浙江和江苏产地的白英购于郑州市医药公司。经鉴定均为茄属植物白英。 1.2 试剂无水葡萄糖（对照品）天津化学试剂三厂生产，其它试剂均为分析纯。 1.3 仪器紫外可见分光光度计Jasco V-550型，V-550工作站（日本岛津科技公司）,石英吸收池；RE-52-99 型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），SHZ-D 循环水式真空泵（郑州市上街区长虹仪器仪表厂），DGB/20-002台式干燥箱（重庆试验设备厂），电子天平FA1004A（上海精密科学仪器有限公司）。 2 方法与结果 2.1 白英中多糖的提取精确称取安徽白英药材粉末(过60目筛)5.0g置于索氏提取器中，以石油醚回流除去脂类，药渣挥去溶剂后，用80%的乙醇提取以除去单糖、低聚糖等干扰成分，最后用水提取多糖。提取液在50℃经减压浓缩至原体积的1/3左右,浓缩液中加入3～5倍量的95%的乙醇,静置，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤多次，60℃烘干至恒重，得白英多糖。 2.2 供试品溶液的制备精确称取安徽白英药材粉末3.0 g，置圆底烧瓶中，石油醚回流脱脂，药渣挥去溶剂后，加80%乙醇100 ml，回流提取，趁热过滤，残渣用80%热乙醇洗涤3次，10 ml/次。残渣挥干乙醇，加蒸馏水60 ml，沸水浸提，趁热过滤，残渣用热水洗涤3次，10 ml/次。洗液并入滤液中，放冷后，移置100ml的容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，精确量取上述溶液1 ml于10 ml容量瓶中，按“2.3.3”方法显色，稀释至刻度，即得供试品溶液。 2.3 标准曲线的绘制 2.3.1 葡萄糖标准溶液的制备精确称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品10 mg，蒸馏水溶解定容于100 ml容量瓶中，配成浓度0.1 mg/ml的标准葡萄糖溶液备用。 2.3.2 6%苯酚溶液的制备称取苯酚100 g，加铝片0.1 g和碳酸氢钠0.05 g，蒸馏收集182℃馏分。称取 6.67 g 馏分水溶解后，置于100 ml棕色容量瓶中,用水稀释至刻度。 2.3.3 测定波长的选择精密移取葡萄糖标准溶液0.60 ml置于10 ml容量瓶中，加水补足2 ml，加入苯酚溶液1.4 ml，并迅速加入6.0 ml浓硫酸，摇匀后,放置5 min ，置沸水浴中加热15 min ，取出冷水浴10 min并稀释至刻度；另取2 ml蒸馏水，加苯酚与浓硫酸同上步骤作为参比，从370～520 nm每隔5 nm测定1次吸光度，以吸光度的最大值选择测定波长为490 nm。 2.3.4 标准曲线的绘制精密移取葡萄糖标准溶液0.50，0.70，0.90，1.10，1.30，1.50，1.70 ml ，分别置于10 ml容量瓶中，加水补足2 ml,用“2.3.3”方法显色后,于490 nm处测吸光度，以吸光度A对溶液浓度 C(mg/ml )进行回归分析，得标准曲线回归方程： A=54.553 6C-0.072 7 r=0.999 2 说明本方法在0.005～0.017 mg/