急慢性应激对小鼠空间学习记忆功能的影响及 IGFⅡ的作用.pdfVIP

摘要 摘要 本研究采用足底电击应激原建立急性应激动物模型；采用7 种应激方式（禁水、束缚 +热刺激、禁食、高台、冷水刺激、电击足底、束缚，21 天）建立慢性应激动物模型，研 究急、慢性应激对不同月龄小鼠自发行为和空间学习记忆能力的影响及其作用机制。以旷 场实验检测小鼠在新异环境中的自发活动和探究行为；采用Morris 水迷宫试验测定小鼠空 间学习记忆能力；采用 HE 染色观察小鼠海马和前脑皮层神经元的形态变化；通过免疫组 织化学方法检测小鼠海马和前脑皮层IGF- Ⅱ的表达。 研究结果： 1. 急性应激后即刻，与青年对照组小鼠相比，青年应激组小鼠的爬行格数和直立次数明 显增加，中央格停留时间和粪便粒数显著减少；应激停止后一周，青年应激组小鼠各项行为 指标与对照组小鼠相比，无显著性差异。急性应激后即刻和应激停止后一周，老年应激组小 鼠的旷场行为与青年应激组小鼠的变化趋势是一致的。 急性应激后即刻，与青年对照组小鼠相比，老年对照组小鼠爬行格数和直立次数明显减 少。 2. 在定位航行实验中，急性应激后即刻，青年组小鼠和老年组小鼠的逃避潜伏期分别 与对照组小鼠相比均显著缩短；与青年组小鼠比较，老年对照组小鼠和老年应激组小鼠的逃 避潜伏期均明显延长。应激停止后一周，对照组小鼠和应激组小鼠的逃避潜伏期无显著性差 异。 空间搜索试验中，在急性应激后即刻，青年和老年应激组小鼠在第一象限（原平台象 限）的游泳时间分别与对照组小鼠相比均明显延长。青年和老年对照组小鼠比较无显著性 差异。应激停止后一周，应激组与对照组无显著性差异。 3. 急性应激后即刻与应激停止后一周，与对照组小鼠比较，青年应激组小鼠和老年应 激组小鼠的神经元形态结构没有显著变化。 急性应激后即刻，应激组小鼠海马和前脑皮层 IGF- Ⅱ阳性细胞数明显增加，平均目标 灰度值显著降低，各脑区 IGF- Ⅱ表达均显著上升；青年应激组小鼠变化尤为明显。应激停 止后一周，应激组与对照组 IGF- Ⅱ的表达无显著性差异。分别与青年对照组和应激组小鼠 相比，老年对照组和应激组小鼠IGF- Ⅱ的表达显著降低。 4. 慢性应激后即刻，与青年对照组小鼠相比，青年应激组小鼠的爬行格数、直立次数 和修饰次数均显著减少，中央格停留时间和粪便粒数显著增加；应激停止后一周，青年应激 组的爬行格数仍显著减少，中央格停留时间和粪便粒数仍显著增加。老年组小鼠在应激后即 刻和应激停止后一周，与青年组小鼠的变化趋势是一致的，且变化更明显。 慢性应激后即刻，与青年对照组小鼠相比，老年对照组小鼠的直立次数和修饰次数明显 减少。 I 摘要 5. 慢性应激后即刻和应激停止后一周，在定位航行试验中，青年应激组小鼠和老年应 激组小鼠的逃避潜伏期与相应对照组相比，均显著降低；与青年组小鼠相比，老年组小鼠 的逃避潜伏期显著延长。 在空间搜索试验中，慢性应激后即刻，青年应激组小鼠和老年应激组小鼠在第一象限（原 平台象限）的游泳时间与相应对照组相比，均显著缩短。青年对照组小鼠和老年对照组小鼠 相比，无显著性差异。 6. 慢性应激组小鼠与对照组小鼠相比，海马和前脑皮层神经元数目减少，排列松散、 稀疏，有细胞着色浅，染色不均匀，且有细胞发生萎缩。与青年对照组相比，老年对照组小 鼠各脑区神经元分布略有稀疏，但细胞结构完整，排列整齐。与青年应激组小鼠比较，老年 应激组小鼠的神经元损伤情况更为严重，在应激停止后一周后仍无显著改变。 慢性应激组小鼠海马和前脑皮层 IGF- Ⅱ阳性细胞数目显著减少，平均目标灰度值明显 增加，各脑区 IGF- Ⅱ的表达均显著下调；老年应激组小鼠的变化更为明显。与青年对照组 小鼠和应激组小鼠相比，老年对照组和应激组小鼠IGF- Ⅱ的表达明显降低。 研究结论： 1. 随着年龄的增长，小鼠在新异环境中的自发行为和探究活动能力降低；空间学习记 忆能力减退。 2. 急性应激增强小鼠的旷场行为，显著增强小鼠的空间学习记忆能力；而慢性应激减 少小鼠的旷场行为，明显损伤小鼠的空间学习记忆能力。 3. 急性应激对神经元形态结构无明显影响；慢性应激则会导致小鼠海马和前脑皮层神 经元形态发生变化，老年鼠的变化更为显著。 4. 急性应激使小鼠海马和前脑皮层的IGF- Ⅱ表达明显上调；慢性应