检测鸡蛋中沙门氏菌的LAMP方法的建立和初步应用.PDFVIP

安徽农业大学学报, 2011, 38(1): 43-47 Journal of Anhui Agricultural University [DOI]CNKI: 34－1162/S1411.000 检测鸡蛋中沙门氏菌的LAMP方法的建立及初步应用 1,2 2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2* 唐梦君 ，周 生 ，张小燕 ，顾 荣 ，蒲俊华 ，葛庆联 ，高玉时 (1. 农业部家禽品质监督检验测试中心，扬州 225003 ；2. 中国农业科学院家禽研究所，扬州 225003) 摘 要：根据GenBank 上公布的沙门氏菌invA 基因序列中的保守区域，设计一套环介导等温扩增（LAMP ） 引物，将其用于沙门氏菌的检测，结果成功地扩增出特异性的梯形条带。LAMP 方法检测沙门氏菌纯培养的灵敏 2 -1 度为 1.04 ×10 cfu·mL ，对11 株不同细菌进行LAMP 检测，仅沙门氏菌获得阳性结果。应用该方法对扬州市场 上销售的鸡蛋进行沙门氏菌检测，检测结果与传统培养方法相符合。因此，LAMP 方法检测沙门氏菌具有灵敏度 高，特异性强，耗时短，方法简便等特点，有望发展成为快速检测鸡蛋中沙门氏菌的有效手段。 关键词：沙门氏菌；环介导等温扩增技术；鸡蛋 中图分类号：S851.347.202 文献标识码：A 文章编号：1672−352X (2011)01−0043−05 Loop-mediated isothermal amplification assay for rapid detection of Salmonella spp. TANG Meng-jun1,2 2 1,2 1,2 , ZHOU Sheng , ZHANG Xiao-yan , GU Rong , PU Jun-hua1,2, GE Qing-lian1,2, GAO Yu-shi1,2 (1. Quality Inspection Center for Poultry of Ministry of Agriculture, Yangzhou 225003; 2. Poultry Insitute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Yangzhou 225003) Abstract: Salmonella spp. is an important kind of food-borne pathogenic bacteria which can cause human and animal disease. Salmonella invA gene is known as a major virulence gene. According to published Salmonella invA gene sequence in GenBank, we designed one sets of specific loop-mediated isothermal amplification primers and developed a novel and highly specific loop-mediated isothermal amplification assay for the sensitive and rapid detection of Salmonella spp. The assay correctly identified Salmonella spp., but did not detect 7 non-Salmonella spp. strains. Sen