八氢番茄红素合成酶PSY2基因果实特异表达载体的构建.pdfVIP

舞拓置秉(学术版) 一23一 JOURNALOFCHANGJIANGVEGETABLES 2010(20)：23—26 DOI：10．3865／j．issn．1001—3547．20lO．20．009 八氢番茄红素合成酶(PSY2) 基因果实特异表达载体的构建 刘顺枝，朱雪娇，杨礼香，王小兰 (广州大学生命科学学院，广东广州，510006) 摘要：八氢番茄红素合成酶是番茄红素合成的关键酶，通过PCR法获取PSY2基因和E8启动子序列，将目的基因 和E8启动予序列构建到植物表达栽体pBll01．2中，构建了果实特异表达启动子的八氢番茄红素合成酶基因植物 表达载体。并采用PCR、限静l性内切酶酶切和序列测定分析法，对重组质粒进行鉴定。结果表明。番茄果实特异性表 步PSY2蛋白在番茄果实中特异表达奠定了基础。 关键词：番茄PsY2：果实特异性启动子：栽体构建 番茄红素是一种重要的类胡萝卜素。它广泛存 鉴定，目前从番茄中分离得到PsYl和PSY2，其中， 在于水果及蔬菜中，在番茄、杏、番石榴、西瓜、番木 PsyJ基因在番茄果实和花中特异性表达。而P：sy2 瓜、红葡萄柚、红肉脐橙中均含有较多的番茄红素， 基因则主要在番茄叶片中表达【1J。除番茄和玉米外， 尤以番茄中的含量为最高。八氢番茄红素合成酶 (PsY)是植物类胡萝卜素生物合成途径中促进番茄 红素合成的上游的关键酶。催化两分子的GGPP缩 合形成八氢番茄红素．PsY基因最早在番茄中分离 红素的抗氧化活性的发现，以及在流行病学研究中 Lyp浓度与前列腺癌、食道癌、胰腺癌、胃肠癌、乳 腺癌、膀胱癌等的发生率呈负相关．引起了科研人 基金项目：广州市科技计划项目(2008J1一C251—2)，广州市属 高校科技计划(08C030) 员的密切关注闭。植物番茄红素基因工程取得了可 刘顺枝(1968一)，女，副教授，硕士，主要从事植物生理和 生物技术研究，E—mil：liusz@gzhu．edu．cn 胚乳特异性启动子控制下进行过量表达．结果获得 王小兰(1973一)，通信作者，女，教授，博士，主要从事 胚乳中积累八氢番茄红素的稻米。BraIIllev等14】将番 植物分子遗传学研究，E—mail：wxll972@邸hu．edu．cn 茄巧】，基因反义导入番茄，结果GGPP积累，而类 收稿日期：20lO—03—19 胡萝卜素含量大大下降，表明髂y基因在番茄类胡 ofa Sweet No．5诵th Yield DevelopmentSuper CornJingtianHighQuali哆and DAI Huixue，XIONG Yuanzhon品CHENQinbin Re∞arch 《N觚j沁v嘟蛐s hstimte，N舭jing2l0042) sweetcomcIdtiV盯wIIich No．5，a has inbred—line Ah咖阳ct：Jingtiansuper highquaJjty蛐dyield，w聃cm8sed by 403325-4勰fem