黄瓜转基因技术体系及相关基因转化研究进展.pdfVIP

畏弘置纂(学术版) VEGETABLES 一4一 20lO(20)：4—8 JOURNALOFCHANGJlANG DOI：10．3865／j．issn．1001—3547．2010．20．003 黄瓜转基因技术体系及相关基因转化研究进展 魏爱民，杜胜利，韩毅科，张桂华，刘楠，崔兴华 (天津科润公司黄瓜研究所，300192) 摘要：从黄瓜离体体细胞再生体系、遗传转化方法、目的基因、转基因植株安全性研究等方面。综述了国内外黄瓜 转基因技术的研究进展，并简要分析了我国黄瓜转基因研究中存在的问题。 关键词：黄瓜；转基因：研究进展 黄瓜是我国主要的蔬菜作物之一．是我国保护 状体发生途径。胚状体发生途径因为再生频率较 地栽培面积最大的蔬菜作物。黄瓜在生长过程中极 低，较少采用；多数黄瓜离体体细胞再生体系均采 易遭受各种病虫害及不利环境的影响．黄瓜的产量 用器官发生途径。 和品质大大降低。选育优良品种是解决这些问题的 基因型、激素种类及配比、外植体类型、苗龄、 关键，但由于现有种质资源的限制，采用常规育种 添加AgNO，等被认为是影响黄瓜离体体细胞再生 方法很难在一些性状上有大的突破。随着生物技术 的关键因素【1’习。侯爱菊等【31比较了品种、外植体类 的发展及其在农业领域的广泛应用．应用基因工程 型、不同激素配比等因素对黄瓜离体体细胞再生的 技术有目的地改良性状。特别是采用常规育种方法 影响。发现三者对于芽再生频率均有显著影响。最 无法改良的性状，创造黄瓜育种新种质。为黄瓜育 高每外植体出芽数可为13．2个。 种技术的创新提供了新的途径。 2转化方法 黄瓜的遗传转化研究始于1986年．经过20多a 的发展。研究者在黄瓜再生体系、转化技术体系等 早期的遗传转化是以发根农杆菌为工程菌介 方面进行了大量研究。针对不同目的基因，对转基 导的。Tmlson等【4】采用发根农杆菌感染下胚轴。但 因植株及后代性状进行了详细研究．相关研究报道 由于毛状根再生的频率太低。只得到几株再生植 较多。作者从黄瓜离体体细胞再生体系、转化方法、 株。随后施和平等阁采用发根农杆菌研究了黄瓜子 目的基因等方面归纳整理了国内外黄瓜转基因研 叶外植体毛状根再生的情况．除此之外，未见更多 究进展．并比较国外黄瓜转基因状况，分析了我国 的使用发根农杆菌对黄瓜进行遗传转化的报道。 黄瓜转基因研究中存在的问题．现综述如下。 根癌农杆菌介导的遗传转化，因转化机理研究 比较清楚，转化效率相对较高，目前为多数研究者 1再生体系 所采用。是进行黄瓜转基因研究的主要方法。 高效、稳定的再生体系是农杆菌介导的黄瓜遗 许多研究者16t9l对影响黄瓜遗传转化体系的因 传转化技术的基础。黄瓜离体体细胞再生研究始于 素进行了研究，如农杆菌菌株、质粒载体的类型、细 1979年，根据再生芽产生方式的不同，黄瓜离体体 菌侵染浓度、感染时间、共培养时间、乙酰丁香酮浓 细胞再生体系可分为以下两种：器官发生途径和胚 度及使用方法、抗生素种类及浓度、筛选标记等。旨 在建立成熟的转化体系，将目的基因有效导入黄 瓜。但这些转