利用农杆菌注射法鉴定番茄黄化曲叶病毒的沉默抑制子.pdfVIP

中国蔬菜 2012（16）：32-35 CHINAVEGETABLES 利用农杆菌注射法鉴定番茄黄化曲叶病毒 的沉默抑制子 1 2 1* 张余洋 耶狄迪亚·咖夫尼 李汉霞  （华1 2 以 中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室，湖北武汉 430070； 色列农业研究组织植 物科学研究所，BetDagan50250） 摘 要：利用农杆菌注射法鉴定了番茄黄化曲叶病毒的沉默抑制子V2。将分别携带目标基因与 GFP 表达载体的农杆菌共注射到本氏烟草中，2d后 GFP 瞬时高量表达。西瓜褪绿矮化病毒BV1 基因表达载 体和空载体pBIN分别与 GFP 共侵染7d后，GFP 表达量由于寄主沉默机制而急剧减弱。V2基因表达载 体与 GFP 表达载体共侵染叶片7d后，GFP 仍保持高水平表达，说明V2作为番茄黄化曲叶病毒沉默抑 制子可阻止寄主的沉默机制。农杆菌注射法可快速方便筛选植物病毒沉默抑制子。 关键词：番茄黄化曲叶病毒；沉默抑制子；农杆菌注射 中图分类号：S436.412.1+9 文献标识码：A 文章编号：1000-6346（2012）10-0032-04 De o S S o T Y L C V s termination f ilencing uppressor f omato ellow eaf url iru byAgroinfiltration ZHANGYu-yang ，YEDIDYAGafni ，LIHan-xia1 2 1* 1Key Laboratory ofHorticultural Plant Biology Ministry of Eduction HuazhongAgricultural University Wuhan （ ， ， ， 430070 bei ina 2 nstituteofPlantSciences riculturalResearchOrganizationofIsrael tDagan50250 ，Hu ，Ch ；I ，Ag ，Be ， Israel ） stract We described the utilization of agroinfiltration to screen and verify the silencing Ab ： suppressor，V2，of Tomatoyellowleafcurlvirus （TYLCV）．ThetargetgenetogetherwiththeGFP genewastransientlyco-expressedinleavesofNicotianabenthamiana byagroinfiltrations．Inalltestsof agroinfiltrations，the GFP showedhighexpressionat2dayspostinoculation（dpi），showingthe infiltrationandexpressionwassuccessful．Ontheleavesco-infectedwiththeBV1 geneof Watermelon chloroticstuntvirus ortheemptyvectorpBIN，the GFP fluorescencealmostdisappearedat7dpidueto silencingmechanismofthe hostplant．The leavesco-infected with V2 ，showed continuouslyhigh expressionof GFP ，indicatingthatV2isthesilencingsuppressorofTYLCV．Agroinfiltrationcanbe utilizedaspotenttoolfo